Питательная среда HiMedia MV112-100G Основа мочевинного HiVeg агара (Кристенсен) представляет собой порошковую основу растительного происхождения с конечным pH 6,8 ± 0,2. Среда предназначена для выявления продукции уреазы, особенно у представителей рода Proteus, при этом длительная инкубация может вызывать щелочную реакцию и ложноположительные результаты.

Назначение

Основа мочевинного HiVeg агара (Кристенсен) рекомендована для выявления продукции уреазы, особенно у представителей рода Proteus.

Тип образца: выделенные микроорганизмы из образцов.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Технические характеристики

Методика приготовления

1. Суспендируйте 24,01 г препарата в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 10 фунтов на квадратный дюйм (≈0,069 МПа) и температуре 115 °C в течение 20 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 50 мл стерильного 40%-ного раствора мочевины FD048 и тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные пробирки.
7. Оставьте пробирки в наклонном положении до застывания среды.

Не перегревать и не подвергать среду повторному нагреву: мочевина легко разлагается.

Принцип действия и интерпретация

Мочевинный агар применяется для выявления продукции уреазы. Мочевинный агар по Кристенсену позволяет выявлять уреазную активность у всех быстро уреазоположительных микроорганизмов рода Proteus, а также у других представителей семейства Enterobacteriaceae, демонстрирующих замедленную уреазную реакцию.

Повышенная чувствительность метода обеспечивается следующими изменениями состава:

1. добавлением глюкозы в среду;
2. снижением концентрации пептона;
3. снижением буферной ёмкости среды, благодаря чему фиксируется даже небольшое количество образовавшейся щёлочи.

Основа мочевинного HiVeg® агара отличается от основы мочевинного агара полной заменой пептонов животного происхождения на пептоны растительного происхождения для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Функции компонентов:

• пептон HiVeg® служит источником необходимых питательных веществ;
• декстроза является источником энергии;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды;
• фосфаты выполняют буферную функцию;
• мочевина гидролизуется с высвобождением аммиака;
• индикатор феноловый красный выявляет образующуюся щёлочность по изменению цвета среды с оранжевого на розовый.

Продолжительная инкубация может привести к появлению щелочной реакции в среде. Для исключения ложноположительных результатов используют среду без мочевины в качестве отрицательного контроля.

Все среды для тестирования мочевины основаны на выявлении образования щёлочи и поэтому не предназначены для определения абсолютной скорости уреазной активности. Утилизация белков может повышать pH до щелочных значений вследствие гидролиза белка, а избыточное высвобождение аминокислот может приводить к ложноположительной реакции.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для образцов пищевых продуктов и молочных продуктов применяйте соответствующие методики отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методики отбора и обработки образцов согласно установленным руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках, установленных наклонно, образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель желтовато-оранжевого цвета.

Реакция

Реакция 2,4%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления стерильного 40%-ного раствора мочевины FD048 и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

$ Ранее обозначался как Proteus vulgariserogenes.

Ограничения метода

1. Продолжительная инкубация может вызвать щелочную реакцию в среде.
2. Все среды для тестирования мочевины основаны на образовании щёлочи и не являются специфичными для определения абсолютной скорости уреазной активности.
3. Утилизация белков может повышать pH до щелочных значений вследствие гидролиза белка, а избыточное высвобождение аминокислот может вызывать ложноположительную реакцию.

Условия хранения и срок годности

• Условия хранения сухого продукта: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закройте флакон и храните продукт в сухом виде для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в течение указанного срока годности.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении по инструкции на этикетке, соблюдении рекомендованной температуры хранения и использовании до истечения срока годности.

Меры безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную