HiMedia MV1064-500G Основа HiVeg агара для идентификации листерий
Обезвожденная основа питательной среды HiMedia MV1064-500G Основа HiVeg агара для идентификации листерий предназначена для приготовления агара PALCAM и поставляется в фасовке 500 г. Основа используется для селективного выделения и идентификации видов Listeria в пищевых продуктах и воде; для различения видов необходимы дополнительные биохимические тесты.
Описание
Обезвожденная основа питательной среды HiMedia MV1064-500G Основа HiVeg агара для идентификации листерий предназначена для приготовления агара PALCAM и поставляется в фасовке 500 г. Основа используется для селективного выделения и идентификации видов Listeria в пищевых продуктах и воде; для различения видов необходимы дополнительные биохимические тесты.
Назначение
HiMedia MV1064-500G — обезвоженная основа HiVeg агара для идентификации листерий, также известного как агар PALCAM (полимиксин—акрифлавин—хлорид лития—цефтазидим—эскулин—маннитол). Среда рекомендована для селективного выделения и идентификации видов Listeria.
Тип образца:
- Пищевые продукты
- Вода
Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.
Состав
Для приготовления среды используется следующий состав:
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Пептон HiVeg® | 23,000 |
| Крахмал | 1,000 |
| Хлорид натрия | 5,000 |
| Маннитол | 10,000 |
| Цитрат аммония-железа | 0,500 |
| Эскулин | 0,800 |
| Декстроза (глюкоза) | 0,500 |
| Хлорид лития | 15,000 |
| Феноловый красный | 0,080 |
| Агар | 13,000 |
| Конечный pH при 25 °C | 7,0 ± 0,2 |
Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным параметрам рабочих характеристик.
Методика приготовления среды
- Суспендируйте 69,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
- Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов соответствует ориентировочно 0,103 МПа.
- Охладите среду до 45–50 °C.
- В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое двух флаконов селективной добавки для Listeria PALCAM (FD061).
- Тщательно перемешайте.
- Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
Принцип действия и интерпретация
Род Listeria включает виды Listeria monocytogenes, Listeria ivanovii, Listeria seeligeri, Listeria welshimerii, Listeria innocua, Listeria grayi, Listeria murrayi и Listeria denitrificans. С заболеваниями человека связаны L. monocytogenes и L. ivanovii; патогенность L. ivanovii считается неопределённой.
Listeria monocytogenes обнаруживается в различных местообитаниях, включая нормальную микрофлору здоровых жвачных животных, желудочно-кишечный тракт людей без симптомов заболевания, а также объекты окружающей среды: речную воду, сточные воды, почву, силос, удобрения и разлагающуюся растительность.
Агар PALCAM предназначен для выделения L. monocytogenes из пищевых продуктов. Селективность среды обусловлена присутствием хлорида лития, цефтазидима, полимиксина B и гидрохлорида акрифлавина. Дифференциально-диагностические свойства PALCAM основаны на двух индикаторных системах:
- эскулин и цитрат железа-аммония;
- маннитол и феноловый красный.
Основа агара для идентификации Listeria HiVeg® PALCAM отличается от основы агара для идентификации Listeria PALCAM полной заменой пептонов животного происхождения на растительные пептоны, что позволяет избежать рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).
Функции компонентов
- Пептон HiVeg® обеспечивает микроорганизмы источниками углерода и азота, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и необходимыми питательными веществами для роста.
- Декстроза (глюкоза), крахмал и маннитол служат источниками углеводов и энергии.
- Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.
- Феноловый красный является индикаторным красителем pH и изменяет окраску при изменении pH среды.
Биохимические реакции и окраска колоний
L. monocytogenes гидролизует эскулин с образованием эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом аммония-железа с образованием коричнево-чёрного комплекса, который проявляется в виде чёрного ореола вокруг колоний.
L. monocytogenes не ферментирует маннитол. Загрязняющие микроорганизмы, включая Enterococci и Staphylococci, ферментируют маннитол; реакция сопровождается изменением окраски среды с красной на жёлтую.
В условиях микроаэрофилии подавляются строгие аэробы, такие как виды Bacillus и Pseudomonas.
Добавление яичного желтка в концентрации 2,5 % об./об. к агару PALCAM описано как способствующее восстановлению повреждённых клеток. Среда с добавленной кровью, нанесённая поверх агара PALCAM, позволяет дифференцировать и подсчитывать гемолитические виды Listeria.
В зависимости от типа образца перед инокуляцией на агар PALCAM HiVeg® следует использовать селективный бульон для предварительного обогащения. Для молочных продуктов обычно применяют селективную среду обогащения Listeria. Для мяса и птицы используют основу среды обогащения Listeria HiVeg® UVM (MV890A) и основу вторичного обогащённого бульона Фрейзера HiVeg® (MV1083).
На агаре PALCAM HiVeg® колонии Listeria после инокуляции и инкубации при 35 °C в течение 24–48 ч в аэробных или микроаэрофильных условиях имеют серо-зелёную окраску и чёрный осадок.
Технические характеристики
- Производитель: HiMedia
- Артикул: MV1064-500G
- Назначение изделия: основа питательной среды
- Фасовка: 500 г
- Рабочая среда: агар PALCAM HiVeg®
- Конечный pH: 7,0 ± 0,2 при 25 °C
- Концентрация для приготовления среды: 69,0 г на 1000 мл воды
- Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин
- Дополнительный компонент: селективная добавка PALCAM FD061, восстановленное содержимое 2 флаконов
- Условия инкубации для культуральных характеристик: 35–37 °C, 24–48 ч
- Атмосфера инкубации для культуральных характеристик: микроаэрофильная
- Форма продукта: светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок
- Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,3%-ным агаровым гелем
- Цвет и прозрачность приготовленной среды: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри
- Реакция: реакция 6,9%-ного водного раствора при 25 °C
- Диапазон pH: 6,80–7,20
- Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
- Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
- Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики определяли в микроаэрофильных условиях с добавлением селективной добавки PALCAM (FD061) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Характеристики колоний |
|---|---|---|---|---|
| Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*) | 50–100 | отсутствует—слабый | ≤10 % | серые колонии с коричнево-зелёным ореолом |
| Listeria monocytogenes ATCC 19111 (00020*) | 50–100 | обильный | ≥50 % | серо-зелёные колонии с чёрным центром и чёрным ореолом |
| Listeria monocytogenes ATCC 19112 | 50–100 | обильный | ≥50 % | серо-зелёные колонии с чёрным центром и чёрным ореолом |
| Listeria monocytogenes ATCC 19117 | 50–100 | обильный | ≥50 % | серо-зелёные колонии с чёрным центром и чёрным ореолом |
| Listeria monocytogenes ATCC 19118 | 50–100 | обильный | ≥50 % | серо-зелёные колонии с чёрным центром и чёрным ореолом |
| Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*) | 50–100 | отсутствует—слабый | ≤10 % | жёлтые колонии с жёлтым ореолом |
* Соответствующие номера WDCM.
Ограничения применения
- Среда не является дифференциальной, поэтому для идентификации и различения видов Listeria требуются дополнительные биохимические исследования.
Контроль качества
Ожидаемые характеристики среды:
- Внешний вид: светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.
- Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,3%-ным агаровым гелем.
- Цвет и прозрачность приготовленной среды: красный прозрачный или слегка опалес
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
Габариты и вес
| Вес | 500г |
|---|
