HiMedia MV106-500G HiVeg агар Снайдера

Питательная агаризованная среда HiMedia MV106-500G HiVeg агар Снайдера на основе растительного пептона, предназначенная для оценки лактобацилл как показателя активности кариеса. HiMedia MV106-500G применяют для определения скорости и степени кислотопродукции микроорганизмов полости рта по изменению цвета индикатора бромкрезолового зелёного; температура хранения среды составляет 10–30 °C.

Назначение

Среда предназначена для оценки количества и скорости образования кислоты лактобациллами в слюне как показателя активности кариеса.

Тип образца: клинические образцы.

Среда B. C. G Dextrose HiVeg® агар (агар Снайдера HiVeg®) изготовлена с заменой пептона животного происхождения на растительный пептон HiVeg®. Среда не содержит компонентов животного происхождения и не связана с рисками BSE/TSE.

Состав

Формула откорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип измерения и интерпретация

Кариес развивается в результате образования кислоты микроорганизмами и формирования зубного налёта. Зубной налёт создаёт условия для развития кариеса, поскольку концентрирует кислотообразующие бактерии на поверхности зуба, обеспечивает анаэробную среду для ферментации, удерживает кислоты и препятствует защитному воздействию слюны.

Кариозные поражения являются результатом химического воздействия на эмаль и дентин. Деминерализация зубных тканей чередуется с периодами реминерализации. Если деминерализация преобладает над реминерализацией, под поверхностью зуба формируется кариозное поражение, которое может перейти в клиническую полость с распространением разрушения на дентин.

Для определения скорости и количества кислоты, образуемой микроорганизмами слюны, Снайдер описал колориметрический метод. Методика использует агаровую среду, известную как агар Снайдера. Позднее Албан модифицировал процедуру и сообщил о более высокой точности по сравнению с первоначальным вариантом. Агар B. C. G Dextrose HiVeg® является модификацией агара B. C. G Dextrose и применяется для той же цели.

Среда является дифференциальной. Дифференциация основана на скорости образования кислоты из декстрозы кислотообразующими микроорганизмами полости рта; результат выявляют по изменению цвета индикатора бромкрезолового зелёного с сине-зелёного на жёлтый.

Пептон HiVeg® служит источником углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и минеральных веществ. Декстроза является источником углеводов, а бромкрезоловый зелёный — индикатором pH.

Методика теста Снайдера

1. Соберите образец слюны до завтрака, до чистки зубов либо непосредственно перед обедом или ужином.
2. Для стимуляции слюноотделения пациент должен жевать парафин в течение 3 мин.
3. Соберите образец слюны в стерильную пробирку или флакон.
4. Тщательно перемешайте образец.
5. Перенесите 0,2 мл образца в стерильную пробирку с расплавленным и охлаждённым до 45 °C агаром теста Снайдера.
6. Перемешайте посевной материал вращением инокулированной пробирки.
7. Инкубируйте пробирку в вертикальном положении при 37 °C в течение 72 ч.
8. Оцените скорость образования кислоты по времени изменения цвета среды: выраженная активность фиксируется через 24 ч, умеренная — при изменении цвета в течение 48 ч, слабая — при изменении цвета в течение 72 ч.

Модифицированная методика Албана

1. Соберите нестимулированную слюну в количестве, достаточном для покрытия среды в пробирке.
2. Если сбор образца затруднён, погрузите стерильный ватный тампон в слюну под языком либо проведите тампоном по поверхности зубов.
3. Поместите тампон непосредственно под поверхность среды.
4. Инкубируйте пробирки при 35 °C вместе с неинокулированной контрольной пробиркой.
5. Исследуйте пробирки ежедневно в течение 4 дней.
6. Сравнивайте изменение цвета исследуемой пробирки с контрольной пробиркой.

Регистрация результатов

• Отсутствие изменения цвета: отрицательный результат, «−».
• Начало изменения цвета на жёлтый: «+».
• Половина среды жёлтая: «++».
• Три четверти среды жёлтые: «+++».
• Вся среда жёлтая: «++++».

Ежедневные результаты показывают скорость и количество образования кислоты. Для установления исходной точки необходимо получить не менее двух образцов, собранных с интервалом 2–4 дня.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 65,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду по 10 мл в пробирки.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите пробирки в вертикальном положении.

Не допускайте перегрева среды.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: MV106-500G
• Назначение изделия: агар
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE
• Масса: 500 г
• Конечный pH при 25 °C: 4,8 ± 0,2
• Диапазон pH по контролю качества: 4,60–5,00
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета, без комков.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0% агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирке образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель изумрудно-зелёного цвета.

pH

pH: 4,60–5,00.

Реакция

Реакция 6,5% масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 4,8 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–72 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методики обращения с образцами согласно установленным лабораторным процедурам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Некоторые микроорганизмы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в потребностях в питательных веществах.

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Условия хранения и срок годности

• Сухую среду хранить при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде.
• Из-за гигроскопичности порошка нарушение условий хранения может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать ёмкость.
• Для сохранения рабочих характеристик использовать продукт в течение установленного срока годности.

Меры безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории и стандартные меры предосторожности при обращении с образцами и культурами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы,