HiMedia MV1035-100G Желчно-эскулиновый HiVeg агар с канамицином

Сухая селективная питательная среда HiMedia MV1035-100G Желчно-эскулиновый HiVeg агар с канамицином содержит 0,100 г/л канамицина. Среда предназначена для селективного выделения и предварительной идентификации бактерий группы Bacteroides fragilis из смешанной микрофлоры при анаэробной инкубации при 35–37 °C.

Назначение

Желчно-эскулиновый HiVeg агар с канамицином применяют для селективного выделения и предварительной идентификации бактерий группы Bacteroides fragilis из смешанной микрофлоры.

Среда представляет собой модификацию исходной рецептуры Swan и приготовлена с заменой пептонов животного происхождения на растительные пептоны. Канамицин обеспечивает селективное подавление факультативно-анаэробных и аэробных грамотрицательных палочек и способствует выделению Bacteroides fragilis.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 44,6 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов силы на квадратный дюйм (примерно 0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Разлейте в стерильные чашки Петри.
6. Не допускайте перегрева среды.

Методика проведения анализа

1. Исследуемый материал можно непосредственно высевать штриховым методом на поверхность подготовленной чашки.
2. После посева немедленно поместите чашки в анаэробные условия и инкубируйте при 35–37 °C.
3. Инкубацию проводите в течение 18–24 ч; при отсутствии роста продолжайте инкубацию до 7 суток.
4. Перед инкубацией восстановите среду, выдержав чашки в анаэробном сосуде в течение 18–24 ч.
5. Интерпретируйте результат по росту микроорганизмов и гидролизу эскулина. Анаэробные микроорганизмы, не способные гидролизовать эскулин, не образуют на этой среде коричневых или чёрных пигментированных колоний.

Принцип действия и интерпретация результатов

Стрептококки группы D имеют в клеточной стенке антиген липотейхоевой кислоты группы D. Представители бывшей группы D, являющиеся преобладающими нормальными обитателями желудочно-кишечного тракта человека, называются фекальными стрептококками или энтерококками.

Уникальная способность энтерококков расщеплять эскулин была описана Meyer и Schonfeld. Энтерококки и стрептококки группы D гидролизуют эскулин до эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием коричневато-чёрного осадка.

Использование гидролиза эскулина для идентификации энтерококков впервые было описано Rochaix. Желчно-эскулиновый агар с канамицином рекомендован для селективного выделения и предварительной идентификации бактерий группы Bacteroides fragilis из смешанной микрофлоры.

В обогащённый желчно-эскулиновый агар добавлены канамицин, гемин и витамин K₁. Гемин и витамин K₁ обогащают среду и усиливают рост видов Bacteroides. Канамицин селективно способствует росту Bacteroides fragilis, одновременно подавляя факультативно-анаэробные и аэробные грамотрицательные палочки.

Пептон HiVeg® № 2 и экстракт HiVeg® являются источниками углерода, азота, аминокислот, витаминов и необходимых для роста питательных веществ. Синтетическое моющее вещество и канамицин подавляют большинство сопутствующих бактерий.

Эскулин в составе среды гидролизуется до эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа с образованием тёмно-коричневого или чёрного комплекса, который визуализируется в виде зоны чёрного осадка вокруг колоний.

Виридансные стрептококки иногда дают слабоположительную реакцию. Виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus, вызывающие инфекции у человека, дают положительную реакцию в тесте на желчный эскулин.

Для усиления роста энтерококков в желчно-эскулиновый агар можно добавлять 50 мл/л лошадиной сыворотки.

Желчно-эскулиновый агар был первоначально разработан Swan для выделения и идентификации стрептококков группы D из пищевых продуктов. Facklam и Moody сообщили, что с использованием желчно-эскулинового агара стрептококки группы D можно дифференцировать от стрептококков, не относящихся к группе D.

Также было показано, что желчно-эскулиновый агар позволяет дифференцировать Enterobacteriaceae, Klebsiella, Enterobacter, Serratia от других родов семейства Enterobacteriaceae по способности гидролизовать эскулин. Для идентификации энтерококков следует дополнительно выполнять другие тесты, включая определение устойчивости к соли.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Желирование

Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.

Реакция среды

Условия определения: реакция 4,46%-ного водного раствора при 25 °C.

Значение pH: 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики MV1035 определяют в анаэробных условиях после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; при отсутствии роста инкубацию продолжают до 7 суток.