HiMedia MV1005-500G Основа S.F.P. HiVeg агара

Питательная среда HiMedia MV1005-500G Основа S.F.P. HiVeg агара с концентрацией при восстановлении 47,0 г/л предназначена для микробиологического анализа пищевых продуктов. Среда используется для предварительной идентификации и количественного определения Clostridium perfringens; анализ проводят с добавлением эмульсии яичного желтка и селективной добавки в анаэробных условиях.

Назначение

S.F.P. HiVeg® Agar Base с добавлением селективной добавки и обогащающей добавки применяется для предварительной идентификации и количественного определения Clostridium perfringens в пищевых продуктах.

Состав

Конечное значение pH при 25 °C: 7,6 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 23,5 г сухой среды в 475 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. Добавьте 25 мл эмульсии яичного желтка FD045 и восстановленное содержимое одного флакона добавки S.F.P. FD013.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Основа S.F.P. HiVeg® Agar приготовлена с использованием гидролизата HiVeg® № 1, не содержащего рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

S.F.P. HiVeg® Agar Base представляет собой модификацию основы агара S.F.P. (Shahidi-Ferguson Perfringens), разработанной на основе рецептуры Shahidi и Ferguson.

Среда с эмульсией яичного желтка и добавкой, содержащей канамицин и полимиксин B в качестве селективных агентов, обеспечивает селективный рост Clostridium perfringens. Гидролизат HiVeg® № 1, папаиновый перевар соевой муки и дрожжевой экстракт поставляют азотистые соединения, углерод, серу, витамины группы B и другие компоненты, необходимые для роста клостридий.

Бисульфит натрия и цитрат аммонийного железа служат индикаторами сероводорода (H₂S). Клостридии восстанавливают сульфит до сульфида; сульфид реагирует с железом с образованием чёрного осадка сульфида железа. В результате формируются чёрные колонии.

Канамицин и полимиксин B, используемые в составе среды, обеспечивают более эффективное восстановление вегетативных клеток и спор Clostridium perfringens, чем полимиксин B или сульфадиазин по отдельности.

Некоторые штаммы Clostridium perfringens могут формировать вокруг колонии непрозрачную зону вследствие лецитиназной активности. Лецитиназа-положительные факультативные анаэробы также могут расти на основе агара SFP HiVeg®, делая чашки полностью непрозрачными и маскируя реакцию с эмульсией яичного желтка, характерную для Clostridium perfringens.

Чёрные колонии на этой среде могут принадлежать организмам, отличным от Clostridium perfringens. Для идентификации необходимо проводить подтверждающие тесты.

Профиль продукта

• Рекомендуемое применение: предварительная идентификация и количественное определение Clostridium perfringens в пищевых продуктах.
• Восстановление: 47,0 г/л.
• Объём приготовленной среды из упаковки 500 г: 10,63 л.
• pH при 25 °C: 7,6 ± 0,2.
• Добавки: эмульсия яичного желтка FD045; добавка S.F.P. FD013.
• Стерилизация: 121 °C / 15 мин.
• Хранение сухой среды: ниже 30 °C.
• Хранение приготовленной среды: 2–8 °C.
• Температурный диапазон: 10–30 °C.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Порошок жёлтого цвета, может иметь слегка зеленоватый оттенок; однородный, сыпучий, без комков.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность

Основная среда образует гель янтарного цвета со слабой опалесценцией. После добавления эмульсии яичного желтка FD045 в чашках Петри образуется жёлтый непрозрачный гель.

Реакция среды

Реакция среды при внесении 4,7 г в 95 мл дистиллированной воды составляет pH 7,6 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч в анаэробных условиях, с добавлением эмульсии яичного желтка FD045 и добавки S.F.P. FD013.

Обозначение «+»: вокруг колонии образуется непрозрачная зона.

Технические характеристики

Селективные добавки и совместимые компоненты

Для приготовления рабочей среды применяются:

• Эмульсия яичного желтка FD045 — 25 мл на 475 мл восстановленной основы.
• Добавка S.F.P. FD013 — восстановленное содержимое одного флакона на 475 мл восстановленной основы.

Селективные агенты в составе добавки S.F.P. — канамицин и полимиксин B.

Отличие от животной основы

Растительная основа MV1005 использует гидролизат HiVeg® № 1, тогда как соответствующая животная основа M1005 содержит триптозу.