Питательная агаровая среда HiMedia MV1004-500G «Модифицированный висмут-сульфитный HiVeg агар» — порошковая селективная среда для выделения и предварительной идентификации Salmonella Typhi и других Salmonella из пищевых продуктов, воды и сточных вод. Среда применяется при температуре хранения 10–30 °C, не подлежит автоклавированию и может ингибировать отдельные штаммы Salmonella, поэтому используется совместно с менее селективными средами.

Назначение

Модифицированный висмут-сульфитный HiVeg агар рекомендуется для селективного выделения и предварительной идентификации Salmonella Typhi и других Salmonella из:

• пищевых продуктов и молочных образцов;
• проб воды;
• сточных вод.

Среда предназначена для микробиологического контроля пищевой продукции, молока и молочных продуктов, водоснабжения и других объектов, в которых требуется выявление бактерий рода Salmonella.

Состав

Расход среды: 40,0 г на 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров рабочих характеристик.

• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа.
• Тип продукта: HiVeg™.
• Физическая форма: порошок.
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности).
• Масса: 500 г.

Принцип действия и интерпретация

Salmonella представляет собой таксономически сложную группу бактерий семейства Enterobacteriaceae. Инфицирование человека Salmonella чаще всего происходит при употреблении пищевых продуктов, воды или молока, загрязнённых выделениями человека или животных. Единственным резервуаром S. Typhi является человек.

Различают четыре клинических типа инфекций, вызываемых Salmonella:

• гастроэнтерит;
• бактериемия или септицемия;
• кишечная лихорадка;
• носительство.

Модифицированный висмут-сульфитный агар является модификацией исходной среды Вильсона—Блэра. Висмут-сульфитный агар применяется для выделения и предварительной идентификации Salmonella, особенно Salmonella Typhi. В модифицированном висмут-сульфитном HiVeg агаре пептоны животного происхождения полностью заменены пептонами растительного происхождения, что исключает риски BSE/TSE, связанные с использованием пептонов животного происхождения.

S. Typhi, S. Enteritidis и S. Typhimurium обычно образуют чёрные колонии с окружающим металлическим блеском. Окрашивание связано с образованием сероводорода и восстановлением сульфита до чёрного сульфида железа. Salmonella Paratyphi A образует светло-зелёные колонии.

Среда может ингибировать отдельные штаммы Salmonella, поэтому не должна использоваться как единственная селективная среда для выделения этих микроорганизмов. Большинство видов Shigella ингибируется; исключение составляют S. flexneri и S. sonnei. Ингибированию также могут подвергаться некоторые виды Salmonella, включая S. Sendai, S. Berta, S. Gallinarum и S. Abortus-equi.

Среда допускает использование более высокой посевной дозы по сравнению с другими селективными средами благодаря выраженному ингибирующему действию на грамположительные микроорганизмы и колиформные бактерии.

Функции компонентов

• Пептон HiVeg® и экстракт HiVeg® служат источниками углерода, азота, витаминов и необходимых факторов роста.
• Декстроза (глюкоза) является источником углерода.
• Гидрофосфат динатрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Индикатор сульфита висмута и бриллиантовый зелёный ингибируют кишечные грамположительные и грамотрицательные бактерии.
• Сульфат железа способствует выявлению образования сероводорода.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте среду в автоклаве и не применяйте дробную стерилизацию: перегрев может разрушить селективность среды.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Чувствительность среды в значительной степени зависит от равномерного распределения осадка сульфита висмута в готовом геле. Перед разливом в стерильные чашки Петри осадок необходимо равномерно диспергировать в среде.

Пробоподготовка и посев

• Клинические образцы можно непосредственно использовать для инокуляции модифицированного висмут-сульфитного HiVeg агара.
• Для пищевых образцов перед инокуляцией выполняют предварительное обогащение пробы.
• При отборе и обработке пищевых и молочных образцов применяют соответствующие методики.
• При отборе и обработке проб воды применяют соответствующие методики и местные нормативные требования.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Не автоклавируйте и не перегревайте среду: перегрев разрушает её селективность.
2. S. Typhi образует типичные коричневые колонии, которые могут иметь или не иметь металлический блеск.
3. Среда является высокоселективной и должна использоваться параллельно с менее селективными средами.
4. У некоторых видов Salmonella типичные чёрные колонии с металлическим блеском наблюдаются в зоне внесения высокой посевной дозы, тогда как изолированные колонии могут быть зелёными.
5. Большинство видов Shigella ингибируется; исключение составляют S. flexneri и S. sonnei.
6. Некоторые виды Salmonella, включая S. Sendai, S. Berta, S. Gallinarum и S. Abortus-equi, также ингибируются.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,27%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: зеленовато-жёлтая опалесцирующая среда с хлопьевидным осадком, образующимся в чашках Петри.
• Реакция: реакция 4,0%-ного водного раствора по массе к объёму при 25 °C; pH 7,6 ± 0,2.
• pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

• Примечание: соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Ожидаемые рабочие характеристики достигаются при использовании среды в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Хранение и срок годности

• Температура хранения закрытой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Максимальный срок хранения приготовленной среды: не более 2 суток.
• Причина ограничения срока хранения приготовленной среды: после 2 суток краситель окисляется, среда приобретает зелёную окраску и может ингибировать некоторые виды Salmonella.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом состоянии.
• Защищайте порошок от влаги: гигроскопичность продукта может