HiMedia MV098-500G Основа Purple HiVeg агара

Основа Purple HiVeg агара HiMedia MV098-500G — сухая питательная среда на растительной основе для изучения ферментации углеводов. Применяется для культурной идентификации чистых культур энтеробактерий и других микроорганизмов; содержит индикатор бромкрезоловый пурпурный.

Принцип измерения и интерпретация

Среды Purple HiVeg® представляют собой модификацию пурпурных сред по методу Веры. В данной версии специальный пептон и говяжий экстракт заменены на растительные аналоги HiVeg® special peptone и HiVeg® extract, что исключает риски заражения BSE/TSE (болезнь Крейтцфельдта — Якоба).

Растительный экстракт и пептон обеспечивают необходимые питательные вещества, в частности азот. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Бромкрезоловый пурпурный служит pH-индикатором, который меняет цвет на жёлтый при закислении среды.

В процессе ферментации углеводов микроорганизмами вырабатываются кислоты, что приводит к изменению цвета индикатора с пурпурного на жёлтый. Образование газа фиксируется с помощью трубок Дюрхама.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 31 г основы MV098 (или 15 г MV284) в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Добавьте 5–10 г тестируемого углевода.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
4. Разлейте по пробиркам и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.

Альтернативный метод стерилизации: Стерилизуйте базовую среду, приготовленную на 900 мл дистиллированной воды, и добавьте к ней 100 мл отдельно стерилизованного 5–10% раствора выбранного углевода.

Посев и инкубация

1. В среду, содержащую углевод, вносят чистую культуру микроорганизма в возрасте 18–24 часа.
2. Инкубируют в течение 24–72 часов (при необходимости до 30 суток) при температуре 35 ± 2 °C.
3. В зависимости от исследуемого организма инкубацию проводят в аэробной или анаэробной атмосфере.

Рекомендации:

• Для предотвращения возможных реакций реверсии рекомендуется использовать концентрацию углевода 1 % (за исключением глюкозы/декстрозы).
• При автоклавировании среды с углеводами следует использовать минимально необходимый нагрев, чтобы избежать гидролиза углеводов.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 6,8 ± 0,2
• Концентрация для приготовления (MV098): 31,0 г/л
• Концентрация для приготовления (MV284): 15,0 г/л
• Общий выход готовой среды из 500 г (MV098): 16,12 л
• Общий выход готовой среды из 500 г (MV298): 33,33 л
• Стерилизация: 121 °C / 15 минут
• Происхождение: без использования компонентов животного происхождения (Veg)
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Температура эксплуатации: 10–30 °C.

Контроль качества

• Внешний вид порошка: однородный, свободно текучий порошок зеленовато-жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаровым гелем MV098.
• Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется прозрачный гель пурпурного цвета, в пробирках — прозрачный раствор.
• Реакция: pH 3,1% (масса/объем) водного раствора MV098 или 1,5% (масса/объем) раствора MV284 составляет 6,8 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Ключ: Acid + = жёлтый цвет. * = ферментативный метаболизм.