HiMedia MV097-500G Основа триптозно-кровяного агара, HiVeg
Основа питательной среды HiMedia MV097-500G Основа триптозно-кровяного агара, HiVeg предназначена для приготовления среды с добавлением 5 % стерильной дефибринированной крови и имеет конечный pH 7,2 ± 0,2. Применяется для выделения требовательных микроорганизмов и определения гемолитических реакций; хранение продукта — при 10–30 °C.
Описание
Основа питательной среды HiMedia MV097-500G Основа триптозно-кровяного агара, HiVeg предназначена для приготовления среды с добавлением 5 % стерильной дефибринированной крови и имеет конечный pH 7,2 ± 0,2. Применяется для выделения требовательных микроорганизмов и определения гемолитических реакций; хранение продукта — при 10–30 °C.
Назначение
Основа триптозно-кровяного агара рекомендуется для выделения требовательных микроорганизмов и определения гемолитических реакций. Основное применение — анализ пищевых образцов.
Среда не содержит декстрозу, поэтому подходит для определения гемолиза. Без добавления крови основу можно использовать как универсальную питательную среду.
Состав
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Гидролизат HiVeg® № 1 | 10,000 |
| Экстракт HiVeg® | 3,000 |
| Хлорид натрия | 5,000 |
| Агар | 15,000 |
| Конечный pH при 25 °C | 7,2 ± 0,2 |
Методика приготовления
- Суспендируйте 33,0 г препарата в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
- Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
- Охладите автоклавированную среду до 45–50 °C.
- В асептических условиях добавьте стерильную дефибринированную кровь в концентрации 5 % об./об.
- Тщательно перемешайте, избегая образования пузырьков воздуха.
- Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
Принцип действия и интерпретация
Основа триптозно-кровяного агара представляет собой среду на основе триптозы, которая после добавления крови обеспечивает культивирование требовательных микроорганизмов.
Гидролизат HiVeg® № 1 и экстракт HiVeg® обеспечивают азотистые и углеродистые соединения, серу, витамины группы B и микроэлементы, необходимые для метаболизма бактерий. Кровь служит дополнительным источником питательных веществ и используется для изучения гемолитических реакций. Среда поддерживает эритроциты в стабильном состоянии и способствует формированию отчётливых зон гемолиза.
Для дальнейшей идентификации микроорганизмов необходимо выполнить биохимические тесты.
Наблюдают четыре типа гемолиза:
- Альфа-гемолиз — частичный лизис эритроцитов вокруг колонии, вызывающий серо-зелёное или коричневатое изменение окраски среды.
- Бета-гемолиз — полный лизис эритроцитов вокруг колонии, вызывающий просветление среды вследствие исчезновения крови.
- Гамма-гемолиз — отсутствие гемолиза и, соответственно, отсутствие изменения окраски среды вокруг колонии. Микроорганизмы без гемолиза обычно называют негемолитическими, а не обозначают как проявляющие гамма-гемолиз.
- Альфа-приме или альфа-гемолиз с широкой зоной — небольшая зона неповреждённых эритроцитов непосредственно рядом с колонией, окружённая зоной полного гемолиза эритроцитов. Такой тип гемолиза можно принять за бета-гемолиз.
Основа триптозно-кровяного агара HiVeg® изготовлена с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения.
Тип образца
- Пищевые образцы.
Отбор и обращение с образцами
Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам.
После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.
Контроль качества
Внешний вид
Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
Гелеобразование
Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
- Основная среда: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
- После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.
Реакция
Реакция 3,3 % масс./об. водного раствора при 25 °C.
- pH: 7,2 ± 0,2.
Диапазон pH
- pH: 7,00–7,40.
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост без крови | Восстановление без крови | Рост с кровью | Гемолиз | Восстановление с кровью |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Neisseria meningitidis ATCC 13090 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥70 % | обильный | отсутствует | ≥70 % |
| Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥70 % | обильный | бета/гамма | ≥70 % |
| Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 (00036*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥70 % | обильный | гамма | ≥70 % |
| Streptococcus pneumoniae ATCC 6303 | 50–100 | от удовлетворительного до хорошего | 40–50 % | хороший | альфа | 50–70 % |
| Streptococcus pyogenes ATCC 19615 | 50–100 | от удовлетворительного до хорошего | 40–50 % | хороший | бета | 50–70 % |
* Соответствующие номера WDCM.
Ограничения применения
- Некоторые требовательные микроорганизмы могут не расти.
- Плотность посевного материала влияет на зону ингибиции: при высокой плотности посева зоны могут быть меньше, а при слабом росте — больше.
Предупреждения и меры предосторожности
- Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
- При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
- Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
- При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
- Руководства по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
Условия хранения и срок годности
- Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C.
- Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
- Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
- Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
- После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните препарат в сухом виде.
- Препарат обладает гигроскопичными свойствами; при попадании влаги возможно образование комков.
- Неправильное хранение может привести к комкованию препарата.
- Храните препарат в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
- После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
- Рабочие характеристики препарата сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.
Оценка рабочих характеристик
Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.
Утилизация
Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.
При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.
Технические характеристики
- Производитель: HiMedia
- Артикул: MV097-500G
- Назначение изделия: основа питательной среды
- Масса: 500 г
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
Габариты и вес
| Вес | 500г |
|---|
