HiMedia MV097-100G Основа триптозно-кровяного агара, HiVeg

Основа триптозно-кровяного агара HiMedia MV097-100G HiVeg для изоляции требовательных микроорганизмов и определения гемолитических реакций. Применяется для анализа проб пищевых продуктов; не содержит декстрозы, что позволяет точно дифференцировать типы гемолиза.

Принцип работы и интерпретация

Основа триптозно-кровяного агара (Tryptose Blood Agar Base) представляет собой среду на основе триптозы, которая при добавлении крови используется для культивирования требовательных микроорганизмов. Отсутствие декстрозы в составе делает среду пригодной для изучения гемолитических свойств бактерий. Среда рекомендована FDA и APHA.

При использовании в качестве общего питательного средства (без добавления крови) или при анализе гемолиза выделяют четыре типа реакций:

1. Альфа-гемолиз ($\alpha$): частичный лизис эритроцитов вокруг колонии, вызывающий серо-зеленое или коричневатое обесцвечивание среды.
2. Бета-гемолиз ($\beta$): полный лизис эритроцитов вокруг колонии, приводящий к просветлению среды.
3. Гамма-гемолиз ($\gamma$): отсутствие гемолиза и изменения цвета среды вокруг колонии (такие организмы называют негемолитическими).
4. Альфа-штрих ($\alpha'$) или широкая зона альфа: небольшая зона сохранных эритроцитов непосредственно у колонии, окруженная зоной полного лизиса красных кровяных телец. Данный тип может быть ошибочно принят за бета-гемолиз.

В модификации HiVeg® животные пептоны заменены растительными, что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией). Растительный гидролизат № 1 и экстракт HiVeg® обеспечивают азот, углерод, серу, витамины группы B и микроэлементы, необходимые для метаболизма бактерий. Кровь служит дополнительным источником питательных веществ и базой для изучения гемолиза.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 33,0 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите стерилизованную среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте, избегая образования пузырьков воздуха, и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Работа с образцами

• Тип образца: пробы пищевых продуктов.
• Сбор и обработка: согласно действующим руководствам по сбору и обработке проб пищевых продуктов.
• Утилизация: загрязненные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % крови: непрозрачный гель вишнево-красного цвета.
• Реакция: pH 7,2 $\pm$ 0,2 для 3,3 % (масс/об) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.
• Вес: 100 г.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Ограничения и меры предосторожности

Ограничения

• Некоторые требовательные микроорганизмы могут не расти на данной среде.
• Плотность посевной дозы влияет на размер зоны ингибирования: высокая плотность может привести к уменьшению зон, а скудный рост — к их увеличению.

Меры предосторожности

• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Ознакомиться с паспортами безопасности (SDS) перед использованием.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом проветриваемом месте, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывать бутылку для предотвращения комкования.