HiMedia MV097-100G Основа триптозно-кровяного агара, HiVeg
Питательная среда HiMedia MV097-100G Основа триптозно-кровяного агара, HiVeg — сухая основа для приготовления среды с конечным pH 7,2 ± 0,2. Применяется для выделения требовательных микроорганизмов и определения гемолитических реакций, при этом некоторые требовательные организмы могут не расти.
Описание
Питательная среда HiMedia MV097-100G Основа триптозно-кровяного агара, HiVeg — сухая основа для приготовления среды с конечным pH 7,2 ± 0,2. Применяется для выделения требовательных микроорганизмов и определения гемолитических реакций, при этом некоторые требовательные организмы могут не расти.
Назначение
Основа триптозно-кровяного агара HiVeg предназначена для:
- выделения требовательных микроорганизмов;
- определения гемолитических реакций;
- культивирования микроорганизмов общего назначения без добавления крови;
- анализа пищевых образцов.
Состав
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров работы.
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Гидролизат HiVeg® № 1 | 10,000 |
| Экстракт HiVeg® | 3,000 |
| Хлорид натрия | 5,000 |
| Агар | 15,000 |
| Конечный pH при 25 °C | 7,2 ± 0,2 |
Методика приготовления
- Суспендируйте 33,0 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
- Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
- Охладите автоклавированную среду до 45–50 °C.
- В асептических условиях добавьте стерильную дефибринированную кровь в концентрации 5 % по объёму.
- Тщательно перемешайте, не допуская образования пузырьков воздуха.
- Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
Принцип действия и интерпретация
Триптозно-кровяной агар — среда на основе триптозы, используемая для культивирования требовательных микроорганизмов после добавления крови. Среда не содержит декстрозу, поэтому подходит для определения гемолитических реакций.
Триптозно-кровяной агар может использоваться как среда общего назначения без добавления крови. Добавленная кровь обеспечивает дополнительные питательные вещества и служит основой для изучения гемолитических реакций. Среда поддерживает клетки крови в сохранном состоянии и способствует формированию чётких зон гемолиза.
Гидролизат HiVeg® № 1 и экстракт HiVeg® обеспечивают соединения азота и углерода, серу, витамины группы B и микроэлементы, необходимые для бактериального метаболизма.
Для дальнейшей идентификации микроорганизмов необходимо провести биохимические тесты.
Тип образца
Пищевые образцы.
Типы гемолиза
- Альфа-гемолиз — частичный лизис эритроцитов вокруг колонии, вызывающий серо-зелёное или коричневатое окрашивание среды.
- Бета-гемолиз — полный лизис эритроцитов вокруг колонии, вызывающий просветление среды вследствие исчезновения крови.
- Гамма-гемолиз — отсутствие гемолиза и, соответственно, отсутствие изменения цвета среды вокруг колонии. Организмы без гемолиза обычно называют негемолитическими, а не гамма-гемолитическими.
- Альфа-прим или широкозональный альфа-гемолиз — небольшая зона неповреждённых эритроцитов непосредственно рядом с колонией, окружённая зоной полного гемолиза эритроцитов. Такой тип гемолиза можно принять за бета-гемолиз.
Использование растительных пептонов вместо пептонов животного происхождения исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивной губчатой энцефалопатией (BSE/TSE).
Пробоподготовка и обращение с образцами
Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим указаниям.
После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
Предупреждения и меры предосторожности
- Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
- При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
- При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
- При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
- Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
Ограничения применения
- Некоторые требовательные организмы могут не расти.
- Плотность посевного материала влияет на размер зоны ингибирования: при избыточной посевной дозе зоны могут быть меньше, а при недостаточном росте — больше.
Контроль качества
Внешний вид
Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
Гелеобразование
Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
- Базовая среда: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
- После добавления 5 % по объёму стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.
Реакция
Реакция водного раствора с концентрацией 3,3 % по массе/объёму при 25 °C.
- pH: 7,2 ± 0,2.
- Диапазон pH: 7,00–7,40.
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением 5 % по объёму стерильной дефибринированной крови.
| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост без крови | Восстановление роста без крови | Рост с кровью | Гемолиз | Восстановление роста с кровью |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Neisseria meningitidis ATCC 13090 | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥70 % | обильный | отсутствует | ≥70 % |
| Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥70 % | обильный | бета/гамма | ≥70 % |
| Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 (00036*) | 50–100 | от хорошего до обильного | ≥70 % | обильный | гамма | ≥70 % |
| Streptococcus pneumoniae ATCC 6303 | 50–100 | от удовлетворительного до хорошего | 40–50 % | хороший | альфа | 50–70 % |
| Streptococcus pyogenes ATCC 19615 | 50–100 | от удовлетворительного до хорошего | 40–50 % | хороший | бета | 50–70 % |
* Соответствующие номера WDCM.
Условия хранения и срок годности
- Хранение сухой среды: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
- Хранение приготовленной среды: при температуре 2–8 °C.
- Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
- После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
- Неправильное хранение может привести к образованию комков.
- Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
- После использования плотно закрывайте контейнер.
- Рабочие характеристики среды сохраняются лучше всего при использовании в течение указанного срока годности.
Утилизация
Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.
При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.
Технические характеристики
- Производитель: HiMedia
- Артикул: MV097-100G
- Назначение изделия: основа питательной среды
- Масса: 100 г
- Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
- Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
- Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
- Диапазон pH: 7,00–7,40
- Концентрация при приготовлении: 33,0 г в 950 мл воды
- Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин
- Давление стерилизации: 15 фунтов/кв. дюйм, ориентировочно 0,103 МПа
- Добавка для приготовления кровяного агара: 5 % по объёму стерильной дефибринированной крови
- Температура добавления крови: 45–50 °C
- Тип образцов: пищевые образцы
- Тип среды без добавления крови: среда общего назначения
- Основа пептонов: растительное сырьё HiVeg®
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
Габариты и вес
| Вес | 100г |
|---|
