HiMedia MV089-500G Основа кровяного агара с низким pH, HiVeg

Основа питательной среды HiMedia MV089-500G Основа кровяного агара с низким pH, HiVeg с конечным значением pH 6,8±0,2. Применяется для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов после добавления стерильной крови; для выявления гемолиза рекомендуется овечья кровь, которая не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus.

Назначение

Основа предназначена для приготовления кровяного агара и выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, включая Neisseria и стрептококки, после добавления стерильной крови.

Тип образца: клинические образцы.

Продукт также может использоваться:

• как универсальная питательная среда без добавления крови;
• с добавлением фенолфталеинфосфата — для выявления стафилококков, продуцирующих фосфатазу;
• с добавлением соли и агара — для оценки поверхностного загрязнения оборудования и туш свиней;
• для определения диапазона солёности, поддерживающего рост морских флавобактерий;
• для приготовления антигенов Salmonella Typhi.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV089-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 500 г
• Конечный pH при 25 °C: 6,8±0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C
• Срок хранения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Кровяной агар представляет собой высокопитательную основу, которая обычно используется для приготовления кровяного агара путём добавления крови. Без добавления крови среда может применяться как универсальная питательная среда, однако pH необходимо скорректировать до 7,2–7,4, поскольку большинство бактерий лучше растёт в слабощелочной среде.

Низкий pH основы кровяного агара — 6,8 — стабилизирует эритроциты и способствует формированию прозрачной зоны гемолиза. Низкий pH также благоприятен для культивирования стрептококков и пневмококков.

Настой HiVeg® и гидролизат HiVeg® № 1 обеспечивают среду источниками углерода, азота, аминокислот и витаминов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Добавление крови повышает питательность среды за счёт дополнительных факторов роста, необходимых требовательным микроорганизмам, а также позволяет визуализировать гемолитические реакции.

Среда HiVeg® отличается от основы кровяного агара с низким pH полной заменой пептонов животного происхождения на пептоны растительного происхождения, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Влияние вида крови на гемолиз

Гемолитические реакции зависят от вида использованной крови:

• овечья кровь даёт наилучшие результаты при культивировании стрептококков группы A;
• овечья кровь не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus, поскольку содержит недостаточное количество пиридиновых нуклеотидов;
• при использовании лошадиной крови колонии H. haemolyticus образуют гемолиз и имитируют Streptococcus pyogenes.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 40,00 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Для приготовления основы без крови используйте корректировку pH до 7,2–7,4.

Культуральные характеристики

Характеристики определены после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базальная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
• После добавления 5–7 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция 4,0%-ного мас./об. водного раствора при 25 °C: pH 6,8±0,2.

Значение pH

6,60–7,00.

Ограничения применения

1. Для выявления гемолиза рекомендуется добавлять овечью кровь. Среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
2. Добавление лошадиной или кроличьей крови к основе поддерживает рост H. haemolyticus, однако образующийся гемолиз может имитировать β-гемолитические стрептококки; результат необходимо подтверждать.
3. Характер гемолиза изменяется в зависимости от источника использованной крови.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия хранения

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при 2–8 °C и используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабоч