HiMedia MV089-100G Основа кровяного агара с низким pH, HiVeg
Основа питательной среды HiMedia MV089-100G Основа кровяного агара с низким pH, HiVeg с конечным pH 6,8 ± 0,2 предназначена для приготовления кровяного агара. Применяется для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов после добавления стерильной крови; среда с овечьей кровью не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus.
Описание
Основа питательной среды HiMedia MV089-100G Основа кровяного агара с низким pH, HiVeg с конечным pH 6,8 ± 0,2 предназначена для приготовления кровяного агара. Применяется для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов после добавления стерильной крови; среда с овечьей кровью не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus.
Назначение
Основа кровяного агара с низким pH, HiVeg рекомендуется в качестве инфузионной среды для выделения и культивирования требовательных патогенных микроорганизмов, включая Neisseria и Streptococci, после добавления стерильной крови.
Тип образцов: клинические образцы.
Среда также может использоваться без добавления крови как универсальная питательная среда. В этом случае pH необходимо скорректировать до 7,2–7,4, поскольку большинство бактерий лучше растёт в слабощелочной среде.
По сравнению с основой кровяного агара с низким pH на основе животных пептонов, версия HiVeg содержит растительные пептоны вместо животных компонентов, что позволяет избежать рисков, связанных с BSE/TSE — губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями.
Состав
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.
| Компонент | г/л |
|---|---|
| Инфузат HiVeg® | 10,000 |
| Гидролизат HiVeg® № 1 | 10,000 |
| Хлорид натрия | 5,000 |
| Агар | 15,000 |
| Конечный pH при 25 °C | 6,8 ± 0,2 |
Принцип действия и интерпретация
Основа кровяного агара представляет собой высокопитательную базовую среду, предназначенную главным образом для приготовления кровяного агара путём добавления крови.
Инфузат HiVeg® и гидролизат HiVeg® № 1 обеспечивают среду источниками углерода, азота, аминокислот и витаминов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.
Добавление крови повышает питательность среды за счёт дополнительных факторов роста, необходимых требовательным микроорганизмам, и позволяет визуализировать гемолитические реакции. Характер гемолиза зависит от вида использованной крови:
- овечья кровь даёт наилучшие результаты при культивировании стрептококков группы A;
- овечья кровь не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus, поскольку содержит недостаточное количество пиридиновых нуклеотидов;
- при использовании лошадиной крови колонии Haemophilus haemolyticus образуют гемолиз и имитируют Streptococcus pyogenes;
- рисунок гемолиза изменяется в зависимости от источника крови.
Низкий pH основы кровяного агара с низким pH — 6,8 — стабилизирует эритроциты и способствует формированию чёткой зоны гемолиза. Такой pH также благоприятен для культивирования Streptococci и Pneumococci.
Среда может применяться:
- с добавлением фосфата фенолфталеина для выявления стафилококков, продуцирующих фосфатазу;
- с добавлением соли и агара для оценки поверхностного загрязнения оборудования и туш свиней;
- для определения диапазона солёности, поддерживающего рост морских флавобактерий;
- для приготовления антигенов Salmonella Typhi.
Методика приготовления среды
- Суспендируйте 40,00 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
- Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
- Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
- Охладите среду до 45–50 °C.
- В асептических условиях добавьте 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
- Тщательно перемешайте.
- Разлейте среду в стерильные чашки Петри.
Контроль качества
Внешний вид
Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
Желирование
Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
Цвет и прозрачность приготовленной среды
Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
После добавления 5–7 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.
Реакция среды
Реакция 4,0%-ного массо-объёмного водного раствора при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.
Диапазон pH: 6,60–7,00.
Культуральные характеристики
Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
| Микроорганизм | Посевная доза (КОЕ) | Рост без крови | Восстановление без крови | Рост с кровью | Восстановление с кровью | Гемолиз |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Neisseria meningitidis ATCC 13090 | 50–100 | удовлетворительный–хороший | 40–50 % | обильный | ≥70 % | отсутствует |
| Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*) | 50–100 | хороший | 50–70 % | обильный | ≥70 % | β |
| Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 (00036*) | 50–100 | хороший | 50–70 % | обильный | ≥70 % | отсутствует |
| Streptococcus pneumoniae ATCC 6303 | 50–100 | удовлетворительный–хороший | 40–50 % | обильный | ≥70 % | α |
| Streptococcus pyogenes ATCC 19615 | 50–100 | удовлетворительный–хороший | 40–50 % | обильный | ≥70 % | β |
* Соответствующие номера WDCM.
Ограничения применения
- Для выявления гемолиза рекомендуется добавлять овечью кровь. Среда не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus.
- Добавление лошадиной или кроличьей крови к основе поддерживает рост Haemophilus haemolyticus, однако микроорганизм может имитировать β-гемолитические стрептококки; результат необходимо подтверждать дополнительными методами.
- Характер гемолиза изменяется в зависимости от источника используемой крови.
Сбор и обращение с образцами
При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.
После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.
Меры предосторожности
Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
При работе с образцами и культурами используйте:
- защитные перчатки;
- защитную одежду;
- средства защиты глаз;
- средства защиты лица.
При обращении с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности и правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
Хранение и срок годности
Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
Храните сухую среду в плотно закрытом контейнере. После вскрытия необходимо обеспечить сухое хранение продукта и плотно закрывать флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер.
Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке. Рабочие характеристики среды гарантируются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.
Утилизация
Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.
Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными процедурами обращения с инфекционными материалами.
Технические характеристики
- Производитель: HiMedia
- Артикул: MV089-100G
- Назначение изделия: основа кровяного агара
- Масса: 100 г
- Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
- Диапазон pH: 6,60–7,00
- Рекомендуемая температура хранения: 10–30 °C
- Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
- Рекомендуемая концентрация при приготов
Характеристики
Производитель/Серия
| Производитель | HiMedia |
|---|
Назначение изделия
| Назначение изделия | Основа |
|---|
Габариты и вес
| Вес | 100г |
|---|
