Питательная агаровая среда HiMedia MV082-500G HiVeg агар МакКонки без кристаллического фиолетового и NaCl — сухая селективно-дифференциальная среда с содержанием агара 20,000 г/л. Среда предназначена для культивирования и дифференциации кишечных бактерий, а отсутствие хлорида натрия препятствует распространению колоний Proteus.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для культивирования и дифференциации кишечных бактерий. Типы исследуемых образцов:

• пищевые продукты и молочные продукты;
• образцы воды.

Среда применяется для микробиологического исследования пищевых продуктов, прямого посева образцов воды при подсчёте колиформных бактерий, а также для работы с клиническими образцами и фармацевтическими препаратами.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована с учётом параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар МакКонки относится к селективно-дифференциальным питательным средам для культивирования кишечных микроорганизмов из различных клинических образцов. Агар и бульон МакКонки также применяются при микробиологическом исследовании пищевых продуктов и прямом посеве образцов воды для подсчёта колиформных бактерий. Среда используется при исследовании молока и молочных продуктов, а также фармацевтических препаратов в соответствии с профильными методическими сборниками.

Исходная формула среды содержит белки, желчные соли, хлорид натрия и два красителя. Селективное действие обеспечивается желчными солями, ингибирующими большинство видов грамположительных бактерий.

Агар МакКонки без кристаллического фиолетового и NaCl с 0,5 % таурохолатом натрия представляет собой модификацию исходной формулы: кристаллический фиолетовый исключён, а желчные соли заменены таурохолатом натрия. Агар МакКонки HiVeg® без кристаллического фиолетового и NaCl, с 0,004 % нейтрального красного и 2,0 % агара имеет ту же основу, что и агар МакКонки без кристаллического фиолетового и NaCl с 0,5 % таурохолата натрия, однако пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами. Такая замена исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE), характерные для пептонов животного происхождения.

Грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на среде и дифференцируются по способности ферментировать лактозу. Штаммы, ферментирующие лактозу, образуют красные или розовые колонии, которые могут быть окружены зоной осаждённых кислотой желчных солей. Красная окраска обусловлена образованием кислоты при ферментации лактозы, поглощением нейтрального красного и последующим изменением окраски красителя при снижении pH среды ниже 6,8.

Штаммы, не ферментирующие лактозу, включая Shigella и Salmonella, образуют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды. Yersinia enterocolitica после инкубации при комнатной температуре может образовывать мелкие колонии, не ферментирующие лактозу.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 55,04 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные чашки Петри.
6. Перед инокуляцией рекомендуется высушить поверхность приготовленной среды.

Не допускайте перегрева среды.

Для культивирования видов Vibrio перед стерилизацией добавьте 5,0 г хлорида натрия на литр среды.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применимым методическим рекомендациям.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб с учётом методических рекомендаций и местных нормативных требований.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой. При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории и стандартные меры предосторожности, установленные применимыми руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Среда дифференцирует микроорганизмы по способности ферментировать лактозу. Для подтверждения идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.
2. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 2,0 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель оранжево-красного цвета.

Реакция

Реакция 5,5 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Ранее известен как Enterobacter aerogenes.

$ Ранее известен как Proteus vulgaris.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После открытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон.
• Из-за гигроскопичности продукта необходимо предотвращать образование комков.
• Неправильное хранение может привести к комкованию порошка.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения