HiMedia MV081-500G HiVeg агар МакКонки с кристаллическим фиолетовым, NaCl

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV081-500G HiVeg агар МакКонки с кристаллическим фиолетовым, NaCl — сухой порошок на растительной основе для селективного выделения и дифференциации колиформных микроорганизмов и других кишечных патогенов. Среда применяется для анализа пищевых продуктов, молочных образцов, воды и фармацевтических образцов; после посева поверхность среды должна быть сухой, а идентификация изолятов требует дополнительных биохимических и серологических тестов.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для селективного выделения и дифференциации колиформных микроорганизмов и других кишечных патогенов.

Применяется для:

• прямого посева проб воды на колиформные палочки;
• исследования пищевых образцов на микроорганизмы, вызывающие пищевые отравления;
• выделения видов Salmonella и Shigella из сыра;
• подсчёта коли-аэрогенов в фекалиях крупного рогатого скота и овец;
• подсчёта коли-аэрогенов и нелактозоферментирующих микроорганизмов в тушках птицы;
• подсчёта бактерий в облучённом консервированном курином фарше;
• выявления коли-аэрогенов при исследовании рода Aeromonas;
• селективного выделения и восстановления представителей семейства Enterobacteriaceae и родственных кишечных грамотрицательных палочек;
• культивирования кишечных микроорганизмов из различных клинических образцов;
• проведения микробиологических испытаний предельного содержания в соответствии с рекомендациями Фармакопеи США (USP).

Среда M081 соответствует среде, рекомендованной Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA), для прямого посева проб воды и ряда пищевых и микробиологических исследований.

Состав

Состав скорректирован и стандартизирован для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Агар МакКонки является слабоселективной и дифференциальной плотной питательной средой. Селективность обеспечивается низкой концентрацией синтетического моющего вещества и кристаллического фиолетового, которые подавляют рост большинства грамположительных бактерий, тогда как грамотрицательные бактерии обычно растут на среде удовлетворительно.

Дифференциация основана на способности микроорганизмов ферментировать лактозу:

• лактозоферментирующие штаммы образуют красные или розовые колонии, иногда окружённые зоной осаждения желчных кислот;
• красная окраска обусловлена образованием кислоты из лактозы, поглощением нейтрального красного и последующим изменением окраски индикатора при снижении pH среды ниже 6,8;
• нелактозоферментирующие штаммы, включая Shigella и Salmonella, образуют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды.

Пептон HiVeg® № 2, гидролизат HiVeg® и пептон HiVeg® служат источниками азота, углерода, аминокислот с длинной цепью и других питательных веществ. Лактоза является сбраживаемым углеводом. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Синтетическое моющее вещество и кристаллический фиолетовый являются селективными агентами, подавляющими рост грамположительных микроорганизмов. Нейтральный красный выполняет функцию индикатора pH.

В составе агара МакКонки HiVeg® пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 51,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте суспензию до кипения, осторожно перемешивая, пока среда полностью не растворится.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева среды.
5. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Требования к образцам

Типы образцов:

• пищевые продукты и молочные образцы;
• пробы воды;
• фармацевтические образцы.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Несмотря на рекомендации по селективному выделению микроорганизмов, для окончательного подтверждения необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические исследования.
2. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета с фиолетовым оттенком.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 5,15 % масс./об. при 25 °C: pH 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления 100 % принята для роста бактерий на агаре с переваром соевых бобов и казеина.