HiMedia MV078-500G Железный HiVeg агар Клиглера

Дифференциально-диагностическая среда HiMedia MV078-500G Железный HiVeg агар Клиглера на основе растительных пептонов. Применяется для идентификации грамотрицательных энтеробактерий из различных образцов по признакам ферментации глюкозы, лактозы и продукции сероводорода H₂S.

Принцип измерения и интерпретация

Железный агар Клиглера представляет собой комбинацию среды с ацетатом свинца и двухсахарного агара Рассела. Среда используется для дифференциации возбудителей брюшного тифа, дизентерии и родственных бацилл. В данной модификации (HiVeg®) животные пептоны полностью заменены растительными для исключения рисков BSE/TSE (губчатой энцефалопатии).

Механизм дифференциации

• Ферментация сахаров: Ферментация глюкозы (декстрозы) приводит к образованию кислоты, что меняет цвет индикатора фенолового красного с красного на жёлтый. Из-за малого количества глюкозы производство кислоты ограничено, и на поверхности среды происходит реокисление, из-за чего скос может оставаться красным. При ферментации лактозы вырабатывается большое количество кислоты, что предотвращает реокисление, и вся среда (включая скос) становится жёлтой.
• Продукция H₂S: Сочетание сульфата железа (II) и тиосульфата натрия позволяет обнаружить выделение сероводорода, что проявляется в виде чёрного окрашивания всего столбика или образованием чёрного кольца у верхней части столбика.
• Реакции:
  • Неферментеры лактозы (например, Salmonella, Shigella): изначально дают жёлтый скос (за счёт глюкозы), но затем скос становится красным (щелочная реакция) из-за окисления кислот в аэробной среде. Столбик остаётся жёлтым (кислым), так как в анаэробной среде реверсии не происходит.
  • Ферментеры лактозы: дают жёлтые скосы и жёлтые столбики.
  • Отсутствие ферментации: среда сохраняет исходный цвет (ни глюкоза, ни лактоза не ферментируются).
  • Газообразование: проявляется в виде отдельных пузырьков, растрескивания или смещения агара в столбике.

Область применения

Среда предназначена для анализа изолированных микроорганизмов из проб пищевых продуктов, молочной продукции и воды. Для идентификации на агар Клиглера пересевают чистые культуры с таких сред, как:

• HiVeg® агар МакКонки (MV081);
• HiVeg® висмут-сульфитный агар (MV027);
• HiVeg® дезоксихолат-цитратный агар (MV065);
• HiVeg® SS-агар (MV108).

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 57,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешать и разлить по пробиркам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,07 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладить пробирки до 45–50 °C в наклонном положении для формирования скоса со столбиком длиной около 25,4 мм (1 дюйм).

Важно: Не использовать пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками. Избегать перегрева во избежание выпадения осадка. Лучшие результаты достигаются на свежеприготовленной среде.

Процедура и ограничения

• Посев: Для инокуляции следует использовать прямую проволочную петлю.
• Образцы: Использовать только чистые изоляты для предотвращения ошибочных результатов.
• Учет результатов: Результаты фиксируются через 18–24 часа инкубации. Превышение этого срока может привести к недостоверным данным.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо обеспечить герметичность крышки для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Утилизация: использованные или непригодные препараты, а также контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.