HiMedia MV078-100G Железный HiVeg агар Клиглера

Дифференциальная питательная среда HiMedia MV078-100G Железный HiVeg агар Клиглера для идентификации грамотрицательных энтерических бацилл. Применяется для анализа проб пищевых продуктов, молочной продукции и воды на основе ферментации глюкозы (декстрозы), лактозы и продукции сероводорода H₂S.

Принцип измерения

Железный HiVeg агар Клиглера представляет собой комбинацию среды с ацетатом свинца (по Клиглеру) и двухсахарного агара Рассела. Среда используется для дифференциации возбудителей брюшного тифа, дизентерии и родственных бацилл.

В данной модификации животные пептоны полностью заменены растительными (HiVeg), что исключает риски, связанные с БЭП/ТСЭ (губчатой энцефалопатией).

Механизмы дифференциации:

• Ферментация глюкозы (декстрозы): приводит к образованию кислоты, что меняет цвет индикатора фенолового красного с красного на жёлтый. Из-за малого количества глюкозы производство кислоты ограничено, что приводит к реокислению индикатора на поверхности (скос остаётся красным).
• Ферментация лактозы: приводит к образованию большого количества кислоты, что предотвращает реокисление, и вся среда (включая скос) окрашивается в жёлтый цвет.
• Продукция сероводорода (H₂S): комбинация сульфата железа (II) и тиосульфата натрия позволяет обнаружить H₂S, что проявляется в виде чёрного окрашивания всего столбика или образования чёрного кольца у верхней части столбика.
• Газообразование: фиксируется в виде отдельных пузырьков, трещин или смещения агара в столбике.

Интерпретация результатов:

• Неферментаторы лактозы (например, Salmonella и Shigella): изначально образуют жёлтый скос (за счёт глюкозы), но затем реакция возвращается к щелочной (красный скос) из-за окисления кислот в аэробной среде. В анаэробном столбике реверсии не происходит, и он остаётся кислым (жёлтый столбик).
• Ферментаторы лактозы: образуют жёлтые скосы и жёлтые столбики.
• Отсутствие ферментации и глюкозы, и лактозы: среда сохраняет исходный цвет.

Область применения

Среда используется для идентификации изолированных микроорганизмов из проб пищевых продуктов, молочной продукции и воды. Для инокуляции рекомендуется использовать чистые культуры с таких сред, как:

• Агар МакКонки HiVeg (MV081);
• Висмутово-сульфитный агар HiVeg (MV027);
• Дезоксиколат-цитратный агар HiVeg (MV065);
• SS-агар HiVeg (MV108).

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 57,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешать и разлить по пробиркам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,07 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладить пробирки до 45–50 °C в наклонном положении для формирования скоса со столбиком длиной около 25,4 мм (1 дюйм).

Важно: не использовать пробирки или бутыли с винтовыми крышками. Избегать перегрева во избежание выпадения осадка. Наилучшие результаты достигаются на свежеприготовленной среде.

Процедура анализа

1. Для инокуляции использовать прямую проволочную петлю.
2. Вносить чистые изоляты микроорганизмов.
3. Инкубировать при температуре 35–37 °C.
4. Результаты следует фиксировать через 18–24 часа; более поздний срок может привести к ошибочным результатам.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Культуральные характеристики

Инкубация при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать крышку для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с лабораторными правилами работы с инфекционными материалами.

Меры предосторожности и ограничения

• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Для инокуляции использовать только прямую проволочную петлю.
• Использовать только чистые изоляты для предотвращения ошибочных результатов.