Порошкообразная основа питательной среды HiMedia MV071-100G Основа желчного бульона, HiVeg для культивирования представителей семейства Enterobacteriaceae; состав содержит пептон HiVeg® — 20,000 г/л. Применяется для посева клинических образцов, включая сгустки крови при подозрении на энтерическую лихорадку, с последующей идентификацией микроорганизмов биохимическими и серологическими методами.

Назначение

Основа желчного бульона HiVeg предназначена для культивирования представителей семейства Enterobacteriaceae и исследования сгустков крови пациентов с подозрением на энтерическую лихорадку.

Среда также может применяться для культивирования и количественного определения нетребовательных к условиям роста бактерий. Животный пептон полностью заменён растительными пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 30,0 г сухой основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 1 мл раствора стрептокиназы с концентрацией 100 000 ЕД/мл.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные пробирки или колбы необходимого объёма.

Принцип действия и интерпретация

Представители семейства Enterobacteriaceae обитают в различных экологических нишах, включая желудочно-кишечный тракт человека и окружающую среду.

При направлении образцов крови пациента с подозрением на энтерическую лихорадку на реакцию Видаля после отделения сыворотки рекомендуется рутинно культивировать сгусток крови. Если кровь была взята с соблюдением строгих асептических мер, сгусток можно поместить в широкую пробирку, заполненную бульоном наполовину, или в широкогорлую флакон-банку с завинчивающейся крышкой, содержащую 80 мл бульона.

Если нельзя исключить присутствие контаминирующих микроорганизмов, что особенно возможно при доставке образцов крови в лабораторию из удалённых мест, сгусток следует непосредственно перенести в пробирку со стерильной бычьей желчью и измельчить с соблюдением асептических мер. После ночной инкубации желчную культуру исследуют на наличие возбудителей кишечных инфекций стандартными методами.

Для культивирования сгустков рекомендован метод со стрептокиназой. Крови дают свернуться порциями по 5 мл в стерильных универсальных контейнерах с завинчивающейся крышкой. Отделившуюся сыворотку удаляют, после чего в каждый контейнер добавляют 15 мл 0,5%-ного желчного бульона с 100 ЕД/мл стрептокиназы. Стрептокиназа вызывает быстрое растворение сгустка и высвобождение бактерий, удерживаемых в сгустке.

Пептон HiVeg® служит источником азота, углерода, аминокислот с длинной цепью и других незаменимых аминокислот. Синтетическое моющее вещество № V ингибирует большинство грамположительных видов. Хлорид натрия поддерживает изотоничность среды. Добавление раствора стрептокиназы вызывает быстрое растворение сгустка и высвобождение бактерий, удерживаемых в сгустке.

Тип образца

• Клинические образцы.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами соблюдайте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

Для окончательной идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Жёлтый прозрачный раствор без помутнения.

Реакция среды

Реакция водного раствора с концентрацией 3,0 % масс./об. при 25 °C: pH 7,6 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Ранее вид назывался Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C. Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию продукта.

Храните основу в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.