HiMedia MV067-500G Основа HiVeg бульона Дюбо

Порошкообразная основа жидкой питательной среды HiMedia MV067-500G Основа HiVeg бульона Дюбо с массой 500 г. Предназначена для быстрого культивирования чистых культур Mycobacterium tuberculosis и родственных микроорганизмов после добавления альбумина, сыворотки или стерильной добавки альбумин-глюкоза.

Назначение

Основа HiVeg бульона Дюбо с добавлением обогащающих компонентов применяется для приготовления жидкой среды для быстрого культивирования чистых культур Mycobacterium tuberculosis и родственных микроорганизмов.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности среды.

Методика приготовления

1. Взвесить 1,3 г порошка и суспендировать в 180 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. При необходимости нагреть для полного растворения среды.
3. Стерилизовать автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладить среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить к каждому объёму 180 мл основы бульона один из следующих компонентов:
   • 20 мл стерильного бычьего альбумина V;
   • стерильную сыворотку;
   • 1 флакон стерильной добавки альбумин-глюкоза (FD201).

Принцип действия и интерпретация

Туберкулёз вызывается Mycobacterium tuberculosis и остаётся значимой проблемой общественного здравоохранения. Возбудитель передаётся с воздушными частицами — ядрами капель, образующимися при кашле пациентов с лёгочным туберкулёзом; заражение происходит при вдыхании восприимчивым человеком частиц, содержащих бактерии.

Бульон Дюбо разработан на основе состава, описанного Дюбо и соавторами, и представляет собой модификацию среды, первоначально сформулированной Дюбо и Дэвисом, а также Дюбо и Миддлбруком. В основе Dubos HiVeg® полностью заменены пептоны животного происхождения на пептоны растительного происхождения. Это исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE), характерные для пептонов животного происхождения.

Механизмы действия компонентов среды:

• гидролизат HiVeg® и L-аспарагин служат источниками азота;
• полисорбат 80, являющийся эфиром олеиновой кислоты, действует как поверхностно-активное вещество;
• полисорбат 80 обеспечивает микобактерии необходимыми жирными кислотами для репликации и усиливает рост за счёт диспергирования бацилл;
• фосфаты совместно с хлоридом кальция обеспечивают буферную ёмкость среды и служат источниками фосфатов;
• сульфат магния, сульфат цинка, сульфат меди и цитрат аммонийного железа являются источниками микроэлементов и сульфатов;
• бычий альбумин связывает свободные жирные кислоты, которые могут быть токсичными для микобактерий;
• альбумин подвергают термической обработке для инактивации липазы, способной высвобождать жирные кислоты из полисорбата 80, включённого в состав среды.

Dubos HiVeg® Broth Base, обогащённая сывороткой, обычно инициирует рост при меньшей посевной дозе и обеспечивает более обильный рост по сравнению с базовой средой, обогащённой альбумином V. При обогащении сывороткой рост обычно имеет более выраженную гранулярную структуру, а при обогащении альбумином — более диффузную.

Культуры микобактерий необходимо обрабатывать с максимальной осторожностью, поскольку они обладают высокой инфекционностью.

Требования к образцам

Тип образца: образцы.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитать маркировку.
• Использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдать надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращаться к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
2. Протеолитические контаминанты вызывают локальное или полное переваривание среды.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или бежевый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Светло-жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция

Реакция 0,65 % мас./об. водного раствора с 1 % глицерина при 25 °C.

pH: 6,6 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,40–6,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления добавки альбумин-глюкоза (FD201), стерильного бычьего альбумина V или стерильной сыворотки, после инкубации при 35–37 °C в течение 2–6 недель в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 %.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения продукта: 10–30 °C.
• Хранить приготовленную среду при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик использовать продукт в пределах установленного срока годности.

Эффективность

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, а также при хранении при рекомендованной температуре и использовании до истечения срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных