HiMedia MV067-100G Основа HiVeg бульона Дюбо

Порошкообразная основа питательной среды HiMedia MV067-100G Основа HiVeg бульона Дюбо — безживотный продукт на основе растительных пептонов для приготовления жидкой среды. С добавлением обогащающих компонентов применяется для быстрого культивирования чистых культур Mycobacterium tuberculosis и родственных микроорганизмов, но как среда общего назначения может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Назначение

Основа HiVeg бульона Дюбо предназначена для приготовления жидкой питательной среды с последующим добавлением стерильного бычьего альбумина V, стерильной сыворотки или стерильной добавки «Альбумин — глюкоза» FD201.

Область применения: быстрое культивирование чистых культур Mycobacterium tuberculosis и родственных микроорганизмов.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV067-100G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Происхождение: без компонентов животного происхождения, растительный продукт
• Материал упаковки: HDPE
• Масса: 100 г
• Температура хранения основы: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH: 6,6 ± 0,2 при 25 °C

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Бульон Дюбо разработан на основе состава, описанного Дюбо, и представляет собой модификацию среды, первоначально разработанной Дюбо и Дэвисом, а также Дюбо и Миддлбруком.

Основа бульона Дюбо HiVeg® соответствует основе бульона Дюбо, за исключением полной замены пептонов животного происхождения на растительные пептоны. Такая замена исключает риски, связанные с BSE/TSE и использованием животных пептонов.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• Гидролизат HiVeg® и L-аспарагин служат источниками азота.
• Полисорбат 80 является сложным эфиром олеиновой кислоты и одновременно действует как поверхностно-активное вещество. Компонент обеспечивает необходимые жирные кислоты для размножения микобактерий и увеличивает рост за счёт диспергирования бацилл.
• Фосфаты совместно с хлоридом кальция буферируют среду и служат источниками фосфатов.
• Сульфат магния, сульфат цинка, сульфат меди и цитрат аммонийного железа обеспечивают микроэлементы и сульфаты.
• Бычий альбумин связывает свободные жирные кислоты, которые могут быть токсичными для микобактерий.
• Альбумин подвергают термической обработке для инактивации липазы, способной высвобождать жирные кислоты из полисорбата 80, входящего в состав среды.

Обогащение основы стерильной сывороткой обычно позволяет инициировать рост из меньшего инокулюма и получить более обильный рост по сравнению с основой, обогащённой альбумином V. При обогащении сывороткой рост обычно имеет более гранулярный характер, а при обогащении альбумином — более диффузный.

При работе с культурами микобактерий необходимо соблюдать максимальную осторожность, поскольку культуры обладают высокой инфекционностью.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 1,3 г порошка в 180 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите основу до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте к каждые 180 мл основы один из следующих компонентов:
   • 20 мл стерильного бычьего альбумина V;
   • 20 мл стерильной сыворотки;
   • 1 флакон стерильной добавки «Альбумин — глюкоза» FD201.

Тип образца

• Образцы.

Обращение с образцами и утилизация загрязнённых материалов

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости используйте указания по безопасности из соответствующих паспортов безопасности.
• При работе с микобактериальными культурами учитывайте их высокую инфекционность.

Ограничения применения

1. Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
2. Протеолитические загрязнители вызывают локальное или полное переваривание среды.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или бежевый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция

Реакция 0,65 % масс./об. водного раствора с 1 % глицерина при 25 °C.

• pH: 6,6 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 6,40–6,80

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления добавки «Альбумин — глюкоза» FD201, стерильного бычьего альбумина V или стерильной сыворотки и инкубации при 35–37 °C в течение 2–6 недель в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 %.

Хранение и срок годности

• Храните основу в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Приготовленную среду храните при 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контей