HiMedia MV043-500G Основа HiVeg агара Бэрд-Паркера

Питательная среда HiMedia MV043-500G Основа HiVeg агара Бэрд-Паркера — растительная сухая основа без компонентов животного происхождения, предназначенная для приготовления селективной среды. Основа применяется для выделения и количественного определения коагулазоположительных стафилококков; температура хранения сухой среды — ниже 30 °C.

Назначение

Основа HiVeg агара Бэрд-Паркера предназначена для выделения и количественного определения коагулазоположительных стафилококков, включая Staphylococcus aureus, в пищевых продуктах.

Идентификация Staphylococcus aureus, выделенного на агаре Бэрд-Паркера HiVeg, должна подтверждаться коагулазной реакцией.

Состав

Количество компонентов указано в г/л:

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Формула откорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

Принцип действия и интерпретация результатов

Основа агара Бэрд-Паркера HiVeg® изготовлена с использованием растительных пептонов, не содержащих рисков, связанных с BSE/TSE.

Среда представляет собой модификацию среды, разработанной Baird-Parker на основе теллурит-глициновой рецептуры Zebovitz и соавторов для выделения Staphylococcus aureus из пищевых продуктов.

• Пируват натрия защищает повреждённые клетки и способствует их восстановлению.
• Хлорид лития и теллурит калия подавляют большинство сопутствующей микрофлоры, за исключением Staphylococcus aureus.
• Глицин и пируват усиливают рост стафилококков.
• После добавления яичного желтка среда приобретает светло-жёлтый непрозрачный цвет.
• Протеолитические бактерии образуют прозрачную зону вокруг колонии на средах, содержащих яичный желток.
• Прозрачная зона и серо-чёрные колонии на этой среде являются диагностическими признаками коагулазоположительных стафилококков.
• При дальнейшем инкубировании вокруг колоний формируется непрозрачная зона, которая может быть связана с липолитической активностью.

Для определения коагулазной активности в основу агара Бэрд-Паркера HiVeg® можно добавлять добавку «Фибриноген — ингибитор плазмы и трипсина» FD195. Добавку растворяют в 10 мл стерильной дистиллированной воды и вносят в 90 мл стерильной расплавленной среды, выдерживаемой при 45–50 °C. Смесь тщательно перемешивают и разливают по чашкам.

На этой среде коагулазоположительные стафилококковые колонии имеют белый или серо-чёрный цвет и окружены непрозрачной зоной коагулазной активности через 24–40 ч инкубации при 35 °C.

При отсутствии эмульсии яичного желтка необходимо восстановление теллурита. В результате образуется полупрозрачный агар с белыми или серыми колониями стафилококков.

Для получения количественных результатов выбирают чашки с 20–200 колониями. Колонии, похожие на Staphylococcus aureus, подсчитывают и исследуют коагулазной реакцией. Результат указывают как количество Staphylococcus aureus на грамм пищевого продукта.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 63 г сухой среды в 950 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа или 1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. В асептических условиях добавьте один из вариантов добавок:
   • 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка FD045 и 3 мл стерильного 3,5%-ного раствора теллурита калия FD047;
   • 50 мл эмульсии яичного желтка с теллуритом FD046.
6. Для идентификации коагулазоположительных стафилококков используйте добавки яичного желтка и теллурита, указанные выше.
7. В качестве альтернативы добавьте один флакон FD195 — добавки «Фибриноген — ингибитор плазмы и трипсина» — на 90 мл среды.
8. Для повышения селективности среды добавьте один флакон FD069 — сульфамидной добавки для агара Бэрд-Паркера — на 1000 мл среды.
9. Перед разливом тщательно перемешайте приготовленную среду.

Для варианта с добавкой FD195 растворите один флакон в 10 мл стерильной дистиллированной воды и внесите в 90 мл стерильной расплавленной среды при 45–50 °C. Перемешайте и разлейте по чашкам.

Добавки

Совместимые добавки:

• Эмульсия яичного желтка FD045 и 3,5%-ный раствор теллурита калия FD047.
• Эмульсия яичного желтка с теллуритом FD046.
• Добавка «Фибриноген — ингибитор плазмы и трипсина» FD195.
• Сульфамидная добавка для агара Бэрд-Паркера FD069.

Восстановление

• Количество сухой среды для приготовления: 63,0 г/л.
• Выход из упаковки 500 г: 7,9 л.
• Выход из упаковки 100 г: 1,58 л.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид порошка

Однородный, сыпучий порошок светло-жёлтого цвета; может иметь слегка зеленоватый оттенок.

Гелеобразование

Образуется плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность

Основная среда образует прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

После добавления эмульсии яичного желтка с теллуритом FD046 в чашках Петри образуется жёлтый непрозрачный гель.

Реакция среды

Реакция 6,3%-ного водного раствора основной среды составляет pH 7,0 ± 0,2 при 25 °C.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавленной эмульсией яичного желтка с теллуритом FD046.

Обозначения:

• + — положительная реакция, прозрачная зона вокруг колонии.
• − — отрицательная реакция