HiMedia MV043-500G Основа HiVeg агара Бэрд-Паркера

Основа HiVeg агара Бэрд-Паркера HiMedia MV043-500G на растительной основе для изоляции и подсчета коагулазоположительных стафилококков. Применяется для анализа пищевых продуктов; обеспечивает высокую селективность за счет использования хлорида лития и теллурита калия.

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию состава Бэрд-Паркера, разработанную на основе теллурит-глициновой формулы. В составе используются растительные пептоны (линейка HiVeg®), что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией).

Основные компоненты и их функции:

• Хлорид лития и теллулурит калия: подавляют рост большинства contaminating-микрофлоры, за исключением Staphylococcus aureus.
• Пируват натрия: защищает поврежденные клетки и способствует их восстановлению.
• Глицин и пируват: стимулируют рост стафилококков.
• Яичный желток (добавляется отдельно): придает среде светло-желтый матовый вид. Протеолитические бактерии создают прозрачную зону вокруг колонии.

Диагностическим признаком коагулазоположительных стафилококков являются серо-черные колонии с прозрачной зоной вокруг них. При длительной инкубации может появиться непрозрачная зона, обусловленная липолитической активностью.

Методика проведения анализа

Приготовление базовой среды

1. Суспендируйте 63 г порошка в 950 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 50 °C.

Добавление добавок (выберите один из вариантов)

• Для идентификации коагулазоположительных стафилококков: асептически добавьте 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и 3 мл стерильного 3,5% раствора теллурита калия (FD047) ИЛИ 50 мл эмульсии яичного желтка с теллуритом (FD046).
• Для определения коагулазной активности: добавьте одну ампулу добавки FD195 (ингибитор трипсина плазмы фибриногена) на 90 мл стерильной расплавленной среды, охлажденной до 45–50 °C.
• Для повышения селективности: добавьте одну ампулу добавки FD069 (сульфа-добавка Бэрд-Паркера) на 1000 мл среды.

Тщательно перемешайте перед розливом в чашки Петри.

Инкубация и интерпретация

• Инкубируйте посевы при температуре 35 °C в течение 24–40 часов (или 35–37 °C до 48 часов).
• Коагулазоположительные стафилококки образуют белые или серо-черные колонии, окруженные непрозрачной зоной коагуляционной активности.
• Для количественного анализа выберите 20–200 колоний, подсчитайте колонии, типичные для Staphylococcus aureus, и подтвердите их идентичность с помощью реакции на коагулазу.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Значение pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2
• Концентрация при приготовлении: 63,0 г/л
• Объем готовой среды из 500 г: 7,9 л
• Стерилизация: 121 °C / 15 минут
• Внешний вид порошка: однородный свободнотекучий порошок светло-желтого цвета, может иметь зеленоватый оттенок
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0% агаром
• Цвет и прозрачность: базовая среда дает светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель; после добавления эмульсии FD046 — желтый непрозрачный гель

Спецификации

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов с добавлением эмульсии яичного желтка с теллуритом (FD046).

Ключ:

• • = положительная прозрачная зона вокруг колонии.
• * = отрицательная, зона отсутствует.
• Оттенки коричнево-черного.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Температурный режим: 10–30 °C.

Предупреждение: Хлорид лития вреден. Избегайте контакта с кожей и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно промойте большим количеством воды.

Совместимость и дополнения

Для полноценного использования основы требуются следующие добавки:

• Эмульсия яичного желтка (FD045)
• 3,5% раствор теллурита калия (FD047)
• Эмульсия яичного желтка с теллуритом (FD046)
• Добавка с ингибитором трипсина плазмы фибриногена (FD195)
• Сульфа-добавка Бэрд-Паркера (FD069)