HiMedia MV043-100G Основа HiVeg агара Бэрд-Паркера

Основа HiVeg агара Бэрд-Паркера HiMedia MV043-100G — сухая питательная среда на растительной основе для изоляции и подсчета коагулаза-положительных стафилококков. Применяется для микробиологического анализа пищевых продуктов; исключает риски BSE/TSE за счет использования растительных пептонов.

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию состава Бэрд-Паркера на основе теллурита и глицина. Хлорид лития и теллурит калия подавляют рост большинства contaminating-микрофлоры, за исключением Staphylococcus aureus. Глицин и пируват натрия стимулируют рост стафилококков, при этом пируват защищает поврежденные клетки и способствует их восстановлению.

При добавлении яичного желтка среда становится светло-желтой и непрозрачной. Протеолитические бактерии образуют зону просветления вокруг колонии. Для коагулаза-положительных стафилококков характерно образование серо-черных колоний с зоной просветления. При более длительной инкубации вокруг колоний может появиться непрозрачная зона, что свидетельствует о липолитической активности.

Методика приготовления и использования

Приготовление базовой среды

1. Суспендируйте 63 г порошка в 950 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 50 °C.

Добавление добавок (выберите один из вариантов)

Для идентификации коагулаза-положительных стафилококков в стерильных условиях добавьте:

• 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и 3 мл стерильного 3,5 % раствора теллурита калия (FD047);
• ИЛИ 50 мл эмульсии яичного желтка с теллуритом (FD046).

Дополнительные опции:

• Для повышения селективности: добавьте одну ампулу добавки BP sulpha (FD069) на 1000 мл среды.
• Для определения коагулазной активности: добавьте одну ампулу добавки Fibrinogen Plasma Trypsin Inhibitor (FD195) на 90 мл стерильной расплавленной среды (при температуре 45–50 °C). В этом случае из-за отсутствия эмульсии желтка агар остается полупрозрачным, а колонии стафилококков окрашиваются в белый или серо-черный цвет.

Тщательно перемешайте перед разливом в чашки Петри.

Предупреждение: Хлорид лития вреден. Избегайте контакта с кожей и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно промыть большим количеством воды.

Интерпретация результатов

Инкубация проводится при 35 °C в течение 24–40 часов (или при 35–37 °C в течение 24–48 часов).

• Коагулаза-положительные стафилококки: белые или серо-черные колонии, окруженные непрозрачной зоной коагулазной активности.
• Количественный анализ: выберите 20–200 колоний, похожих на S. aureus, и подтвердите их идентичность с помощью коагулазного теста. Результат выражается в количестве S. aureus на грамм продукта.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Значение pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2
• Концентрация при приготовлении: 63,0 г/л
• Объем готовой среды из 100 г порошка: 1,58 л

Общие параметры

• Внешний вид порошка: однородный свободнотекучий порошок светло-желтого цвета, может иметь зеленоватый оттенок.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность: базовая среда дает светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель. После добавления эмульсии (FD046) образуется желтый непрозрачный гель.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов с добавлением эмульсии яичного желтка с теллуритом (FD046).

Примечание:

• + = положительная реакция (четкая зона просветления вокруг колонии).
• * = отрицательная реакция (зона отсутствует, цвет в оттенках коричнево-черного).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: при температуре ниже 30 °C.
• Хранение приготовленной среды: при температуре 2–8 °C.
• Температура эксплуатации: 10–30 °C.