HiMedia MV043-100G Основа HiVeg агара Бэрд-Паркера

Питательная среда HiMedia MV043-100G Основа HiVeg агара Бэрд-Паркера — растительная порошкообразная основа без компонентов животного происхождения. Применяется для выделения и количественного определения коагулазоположительных стафилококков; масса упаковки составляет 100 г, расход при приготовлении — 63,0 г/л.

Назначение

Основа агара Бэрд-Паркера HiVeg предназначена для выделения и количественного определения коагулазоположительных стафилококков, включая Staphylococcus aureus, из пищевых продуктов.

Состав

Содержание компонентов указано в граммах на литр:

Конечное значение pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 63 г сухой среды в 950 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,10 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. В асептических условиях добавьте:
   • 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и 3 мл стерильного 3,5%-ного раствора теллурита калия (FD047); или
   • 50 мл эмульсии яичного желтка с теллуритом (FD046).
6. Для выявления коагулазоположительных Staphylococci допускается альтернативное добавление одного флакона добавки с фибриногеном, плазмой и ингибитором трипсина (FD195) на 90 мл среды.
7. Для повышения селективности среды допускается добавление одного флакона сульфитной добавки для агара Бэрд-Паркера (FD069) на 1000 мл среды.
8. Перед разливом тщательно перемешайте среду.

Принцип действия и интерпретация результатов

Основа агара Бэрд-Паркера HiVeg® приготовлена с использованием растительных пептонов, не содержащих рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивной губчатой энцефалопатией.

Среда представляет собой модификацию среды, разработанной Baird-Parker (1, 2) на основе теллуритно-глициновой формулы Zebovitz и соавторов (3) для выделения Staphylococcus aureus из пищевых продуктов.

Пируват натрия защищает повреждённые клетки и способствует их восстановлению. Хлорид лития и теллурит калия подавляют большинство сопутствующей микрофлоры, за исключением Staphylococcus aureus. Глицин и пируват усиливают рост стафилококков.

После добавления яичного желтка среда приобретает светло-жёлтый цвет и становится непрозрачной. Протеолитические бактерии образуют прозрачную зону вокруг колонии на средах, содержащих яичный желток. Прозрачная зона и серо-чёрные колонии на этой среде являются диагностическими признаками коагулазоположительных Staphylococci. При дальнейшем инкубировании вокруг колоний формируется непрозрачная зона, которая может быть связана с липолитической активностью.

По сравнению с другими средами эта среда, как и традиционная среда, оказывает меньшее ингибирующее действие на Staphylococcus aureus и одновременно обладает более высокой селективностью. Идентификация Staphylococcus aureus, выделенного на агаре Бэрд-Паркера HiVeg®, должна быть подтверждена реакцией на коагулазу.

Выявление коагулазной активности

Основа агара Бэрд-Паркера HiVeg® может использоваться для выявления коагулазной активности при добавлении добавки с фибриногеном, плазмой и ингибитором трипсина (FD195).

1. Растворите содержимое FD195 в 10 мл стерильной дистиллированной воды.
2. Добавьте раствор к 90 мл стерильной расплавленной среды, выдерживаемой при 45–50 °C.
3. Тщательно перемешайте.
4. Разлейте среду по чашкам.

На такой среде коагулазоположительные стафилококковые колонии имеют цвет от белого до серо-чёрного и окружены непрозрачной зоной коагулазной активности. Инкубирование проводят при 35 °C в течение 24–40 ч.

Из-за отсутствия эмульсии яичного желтка необходимо снизить концентрацию теллурита. В результате образуется прозрачный агар, а колонии Staphylococci имеют цвет от белого до серого.

Для получения количественных результатов отбирайте чашки, содержащие 20–200 колоний. Подсчитайте колонии, похожие на Staphylococcus aureus, и исследуйте их на коагулазную реакцию. Результат указывайте как количество Staphylococcus aureus на грамм пищевого продукта.

Рекомендуемое применение

• Выделение и количественное определение коагулазоположительных стафилококков.

Профиль продукта

Восстановление среды

• Количество для приготовления: 63,0 г/л
• Из 500 г: 7,9 л готовой среды
• Из 100 г: 1,58 л готовой среды

Добавки

Эмульсия яичного желтка (FD045) и 3,5%-ный раствор теллурита калия (FD047); эмульсия яичного желтка с теллуритом (FD046); добавка с фибриногеном, плазмой и ингибитором трипсина (FD195).

Стерилизация

Температура: 121 °C.

Время: 15 мин.

Водородный показатель

pH 6,8%-ного водного раствора базовой среды при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Условия хранения

• Сухая среда: при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленная среда: 2–8 °C.
• Температурный диапазон, указанный в карточке товара: 10–30 °C.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Однородный, сыпучий порошок светло-жёлтого цвета; может иметь слегка зеленоватый оттенок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность

Базовая среда образует прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета. После добавления эмульсии яичного желтка с теллуритом (FD046) в чашках Петри образуется жёлтый непрозрачный гель.

Реакция

Реакция 6,3%-ного водного раствора базовой среды при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением эмульсии яичного желтка с теллуритом (FD046).