HiMedia MV032-500G Основа HiVeg тетратионатного бульона (без йода)

Порошковая основа питательной среды HiMedia MV032-500G Основа HiVeg тетратионатного бульона (без йода) — растительная рецептура без компонентов животного происхождения. Продукт предназначен для селективного обогащения при выделении серотипа Salmonella Typhi и других сальмонелл из пищевых образцов и материалов санитарного значения; масса упаковки — 500 г.

Назначение

Основа предназначена для приготовления жидкой тетратионатной среды с добавлением раствора йода и бриллиантового зелёного для селективного обогащения при выделении серотипа Salmonella Typhi и других сальмонелл из фекалий, мочи, пищевых продуктов и других материалов санитарного значения.

Тип образца: пищевые образцы.

Рецептура не содержит компонентов животного происхождения: пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Состав

Для приготовления среды используется следующий состав:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 46,0 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию только до кипения.
3. Не автоклавируйте основу.
4. Охладите среду до температуры ниже 45 °C.
5. Добавьте 20 мл раствора йода. Раствор йода готовят из 6 г йода и 5 г йодида калия, растворённых в 20 мл дистиллированной воды.
6. Добавьте 10 мл 0,1%-ного раствора бриллиантового зелёного.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду порциями по 10 мл.

Полную среду следует использовать в день приготовления. В противном случае стерилизованную основу бульона можно некоторое время хранить при 2–8 °C.

Не нагревайте среду после добавления раствора йода. Используйте среду сразу после добавления йода.

Раствор йода: 6 г йода и 5 г йодида калия в 20 мл дистиллированной воды.

Из-за присутствия карбоната кальция приготовленная среда образует опалесцирующий раствор с белым осадком.

Принцип действия и интерпретация

Сальмонеллы широко распространены в окружающей среде и обычно присутствуют в меньшем количестве по сравнению с колиформными бактериями. Поэтому для их выделения необходимо исследовать относительно большой объём образца.

Сальмонеллы в пищевых образцах могут быть сублетально повреждены на различных этапах обработки пищевых продуктов при воздействии низких температур, нагревания, высушивания, излучения и различных химических веществ. Повреждённые клетки способны вызывать порчу продуктов и при попадании в организм — заболевания при благоприятных условиях. Поэтому перед количественным определением важно восстановить повреждённые бактерии.

Жидкая тетратинатная среда с добавлением йода и бриллиантового зелёного применяется для селективного обогащения сальмонелл, включая Salmonella Typhi, из фекалий, мочи, пищевых продуктов и других материалов санитарного значения. Среда первоначально разработана Мюллером и рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для обогащения сальмонелл.

После добавления йода и йодида калия в среде образуется тетратионат. В среде растут микроорганизмы, обладающие ферментом тетратионатредуктазой.

Гидролизат HiVeg® и пептон HiVeg® служат источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Синтетическое моющее вещество подавляет сопутствующие грамположительные микроорганизмы. Селективность среды определяется совместным действием тиосульфата и тетратионата, подавляющих комменсальные колиформные микроорганизмы. Карбонат кальция нейтрализует кислые продукты разложения тетратионата. Бриллиантовый зелёный также повышает селективность в отношении сальмонелл за счёт ингибирования сопутствующих бактерий.

Для дальнейшего подтверждения после инкубации выполните высев обогащённых культур штриховым методом на чашки со следующими селективными средами:

• агар HiVeg® с бриллиантовым зелёным, MV016;
• агар HiVeg® МакКонки, MV081;
• висмут-сульфитный агар HiVeg®, MV027.

Инокуляция и инкубация

1. Асептически внесите исследуемый образец в жидкую тетратионатную среду с добавленными растворами йода и бриллиантового зелёного.
2. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
3. После инкубации выделите микроорганизмы на чашках с селективными средами.

Для обогащения и выделения следует использовать стандартные лабораторные процедуры.

Обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для дальнейшего подтверждения после инкубации выполните высев обогащённых культур на чашки со средами:

• агар HiVeg® с бриллиантовым зелёным, MV016;
• агар HiVeg® МакКонки, MV081;
• висмут-сульфитный агар HiVeg®, MV027.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от белого до кремового.

Форма: однородный сыпучий порошок без комков.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Полная среда с добавленными растворами бриллиантового зелёного и йода: светло-зелёный опалесцирующий раствор с обильным белым осадком. При отстаивании осадок оседает.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после обогащения в тетратионатной среде HiVeg® с добавленными растворами бриллиантового зелёного и йода, последующего пересева на агар HiVeg® МакКонки (MV081) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.