HiMedia MV032-100G Основа HiVeg тетратионатного бульона (без йода)

Основа питательной среды HiMedia MV032-100G Основа HiVeg тетратионатного бульона (без йода) — порошковая среда растительного происхождения в упаковке из полиэтилена высокой плотности (HDPE). Предназначена для селективного обогащения при выделении серотипа Salmonella Typhi и других сальмонелл из фекалий, мочи, пищевых продуктов и материалов санитарного значения; готовую среду не автоклавируют и используют непосредственно после добавления раствора йода.

Назначение

Основа предназначена для приготовления жидкой тетратионатной среды HiVeg с последующим добавлением раствора йода и раствора бриллиантового зелёного. Среда применяется методом селективного обогащения для выделения серотипа Salmonella Typhi и других представителей рода Salmonella из:

• пищевых продуктов;
• фекалий;
• мочи;
• других материалов санитарного значения.

Тип образца: пищевые продукты.

Среда изготовлена без компонентов животного происхождения: животные пептоны полностью заменены растительными пептонами HiVeg.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Сальмонеллы широко распространены в окружающей среде. Обычно они присутствуют в меньших количествах по сравнению с колиформными микроорганизмами, поэтому для их выделения необходимо исследовать относительно большой объём образца.

Сальмонеллы в пищевых образцах могут получить сублетальные повреждения на различных этапах обработки продуктов при воздействии низких температур, нагревания, высушивания, радиации и различных химических веществ. Повреждённые клетки способны вызывать порчу продуктов, а при попадании в организм — заболевания при благоприятных условиях. Поэтому перед количественным определением важно обеспечить восстановление повреждённых бактерий.

Жидкая тетратионатная среда с добавлением йода и бриллиантового зелёного применяется для селективного обогащения сальмонелл, включая Salmonella Typhi, из фекалий, мочи, пищевых продуктов и других материалов санитарного значения. Среда первоначально разработана Mueller и рекомендована APHA для обогащения сальмонелл.

При добавлении йода и йодида калия в среде образуется тетратионат. В среде растут микроорганизмы, обладающие ферментом тетратионатредуктазой. Гидролизат HiVeg® и пептон HiVeg® служат источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ.

Синтетическое моющее вещество подавляет сопутствующие грамположительные микроорганизмы. Селективность среды обусловлена совместным действием тиосульфата и тетратионата, подавляющих сопутствующие комменсальные колиформные микроорганизмы. Карбонат кальция нейтрализует кислые продукты разложения тетратионата. Бриллиантовый зелёный дополнительно повышает селективность в отношении сальмонелл за счёт подавления сопутствующей микрофлоры.

Замена пептонов животного происхождения на растительные пептоны HiVeg® позволяет исключить риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Для дальнейшего подтверждения обогащённые культуры после инкубации высевают штриховым методом на чашки с селективными средами:

• агар HiVeg® с бриллиантовым зелёным (MV016);
• агар МакКонки HiVeg® (MV081);
• висмут-сульфитный агар HiVeg® (MV027).

Методика приготовления и проведения анализа

1. Суспендируйте 46,0 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию только до кипения.
3. Не автоклавируйте приготовленную основу.
4. Охладите основу ниже 45 °C.
5. Добавьте 20 мл раствора йода. Раствор йода готовят из 6 г йода и 5 г йодида калия в 20 мл дистиллированной воды.
6. Добавьте 10 мл 0,1%-ного раствора бриллиантового зелёного.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду порциями по 10 мл.
9. Асептически внесите исследуемый образец в жидкую тетратионатную среду с добавленными растворами йода и бриллиантового зелёного.
10. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
11. После инкубации выделите микроорганизмы на чашках с селективными средами.

Полную среду с добавленными растворами йода и бриллиантового зелёного следует использовать в день приготовления. Если среда не используется сразу, стерилизованную основу бульона допускается хранить некоторое время при 2–8 °C.

После добавления раствора йода среду нельзя нагревать. Среду необходимо использовать сразу после добавления йода.

Раствор йода

Состав раствора:

• йод: 6 г;
• йодид калия: 5 г;
• дистиллированная вода: 20 мл.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо автоклавировать перед утилизацией.

Внешний вид приготовленной среды

Из-за присутствия карбоната кальция приготовленная среда образует опалесцирующий раствор с белым осадком.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от белого до кремового.

Состояние: однородный, легко сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Полная среда с добавленными растворами бриллиантового зелёного и йода: светло-зелёный опалесцирующий раствор с обильным белым осадком; при отстаивании осадок оседает.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после обогащения в тетратионатной среде HiVeg® с добавленными растворами бриллиантового зелёного и йода, последующего пересева на агар МакКонки HiVeg® (MV081) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого