HiMedia MV031-500G XLD HiVeg агар

Питательная агаровая среда HiMedia MV031-500G XLD HiVeg агар — обезвоженная селективно-дифференциальная среда без компонентов животного происхождения с конечным pH 7,4 ± 0,2. Среда предназначена для селективного выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella в клинических, пищевых, молочных и водных образцах; масса упаковки составляет 500 г, температура хранения — 10–30 °C.

Назначение

XLD HiVeg агар рекомендован для селективного выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella.

Тип образца:

• клинические образцы: кровь, фекалии;
• пищевые и молочные образцы;
• образцы воды.

Среда применяется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и микробиологических исследований. XLD-агар разработан для выделения и дифференциации кишечных патогенов, включая Salmonella Typhi, среди других видов Salmonella в пищевых продуктах, воде и молочных продуктах.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

XLD HiVeg агар аналогичен XLD-агару, однако компоненты животного происхождения полностью заменены синтетическими веществами. Такая рецептура исключает риски, связанные с BSE/TSE — губчатой и трансмиссивной губчатой энцефалопатиями.

Среда является одновременно селективной и дифференциальной:

• селективным агентом служит синтетическое моющее вещество № III, ингибирующее грамположительные микроорганизмы;
• дифференциация основана на ферментации углеводов, декарбоксилировании лизина и выявлении образования сероводорода (H₂S).

Дрожжевой экстракт обеспечивает микроорганизмы азотом и витаминами, необходимыми для роста. Ксилоза, лактоза и сахароза служат источниками сбраживаемых углеводов. Ксилоза включена в состав главным образом потому, что Shigella её не ферментирует, тогда как практически все представители кишечной группы ферментируют ксилозу, что позволяет дифференцировать виды Shigella.

Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Лизин используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов. Сальмонеллы быстро ферментируют ксилозу и исчерпывают её запас. После этого фермент лизиндекарбоксилаза декарбоксилирует лизин с образованием аминов, что приводит к возврату среды к щелочному pH и имитирует реакцию Shigella.

Для предотвращения такой реакции у лизинположительных колиформ в среду добавлены лактоза и сахароза, обеспечивающие образование избытка кислоты. Разложение ксилозы, лактозы и сахарозы до кислот вызывает изменение окраски индикатора фенолового красного на жёлтую.

Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, распознаются по появлению красной окраски вокруг колоний вследствие повышения pH. Реакции могут протекать одновременно или последовательно. Поэтому при длительной инкубации индикатор pH может приобретать различные оттенки или менять окраску с жёлтой на красную.

Для дополнительной дифференциации в состав включена система выявления H₂S, состоящая из тиосульфата натрия и цитрата аммония и железа. Образующийся сероводород визуализируется в виде колоний с чёрными центрами.

Непатогенные продуценты H₂S не декарбоксилируют лизин, поэтому образующаяся у них кислая реакция предотвращает почернение колоний.

Рецептура не допускает чрезмерного роста других микроорганизмов поверх колоний Salmonella и Shigella. По сравнению с другими плотными средами, включая SS HiVeg агар (MV108), EMB HiVeg агар (MV022) и бисмут-сульфитный HiVeg агар (MV027), XLD HiVeg агар обладает повышенной селективностью и чувствительностью согласно данным производителя.

Образцы, предположительно содержащие кишечные патогены вместе со смешанной микрофлорой, первоначально обогащают в модифицированной полужидкой основе среды RV.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию из 56,68 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте суспензию при частом перемешивании до кипения среды.
3. Не автоклавируйте среду и не допускайте перегрева.
4. Сразу перенесите среду на водяную баню с температурой 45–50 °C.
5. После охлаждения тщательно перемешайте среду.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Не рекомендуется готовить большие объёмы среды, требующие длительного нагревания.

В среде может образовываться небольшой осадок. Это свойство присуще данной среде и не влияет на её рабочие характеристики.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.
• Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.
• Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. В среде может образовываться небольшой осадок; это свойство присуще данной среде и не влияет на её рабочие характеристики.
2. Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
3. Некоторые штаммы Proteus могут образовывать окраску от красной до жёлтой, при этом большинство колоний развивает чёрные центры, что может приводить к ложноположительным реакциям.
4. Неферментирующие кишечные микроорганизмы, такие как Pseudomonas и Providencia, могут образовывать красные колонии.
5. S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут образовывать красные колонии без H₂S, имитируя виды Shigella.

Технические характеристики

• Назначение изделия: агар
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Тип продукта: HiVeg™
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная рецептура
• Упаковка: контейнер из полиэтилена высокой плотности (HDPE)
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Концентрация водного раствора для определения реакции: 5,67 % масс./об.
• Требование к гелеобразованию: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем