HiMedia MV031-100G XLD HiVeg агар

Питательная агаризованная среда HiMedia MV031-100G XLD HiVeg агар производства HiMedia с массой 100 г. Среда предназначена для селективного выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella в клинических, пищевых, молочных и водных образцах; не подвергать автоклавированию и перегреву.

Назначение

XLD HiVeg агар предназначен для селективного выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella.

Типы исследуемых образцов:

• клинические образцы: кровь, фекалии;
• пищевые и молочные образцы;
• образцы воды.

Среда рекомендована для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и микробиологического контроля. Образцы, предположительно содержащие кишечные патогены в смеси с другой микрофлорой, первоначально обогащают в модифицированной полужидкой основе среды RV.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

XLD HiVeg агар — селективная и дифференциальная питательная среда. В отличие от классического XLD-агара, компоненты животного происхождения полностью заменены синтетическими агентами, что исключает риски, связанные с BSE/TSE.

Селективным агентом служит синтетическое моющее вещество № III, поэтому среда подавляет рост грамположительных микроорганизмов. Формула среды препятствует избыточному росту другой микрофлоры над колониями Salmonella и Shigella.

Дрожжевой экстракт обеспечивает микроорганизмы азотом и витаминами. Ксилоза, лактоза и сахароза служат источниками ферментируемых углеводов. Ксилоза включена в состав, поскольку не ферментируется шигеллами, но практически всегда ферментируется кишечными бактериями, что позволяет дифференцировать виды Shigella.

Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. L-лизин используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов. Сальмонеллы быстро ферментируют ксилозу и исчерпывают её запас. Затем фермент лизиндекарбоксилаза декарбоксилирует лизин с образованием аминов, вследствие чего pH снова становится щелочным и реакция начинает напоминать реакцию Shigella.

Для предотвращения такой реакции у лизинположительных колиформ в среду добавлены лактоза и сахароза, образующие избыток кислоты. Разложение ксилозы, лактозы и сахарозы до кислот вызывает изменение цвета индикатора фенолового красного на жёлтый.

Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, распознаются по появлению красной окраски вокруг колоний вследствие повышения pH. Описанные реакции могут протекать одновременно или последовательно; поэтому индикатор pH может приобретать различные оттенки или при продолжительной инкубации изменять цвет с жёлтого на красный.

Для дополнительной дифференциации используется система индикации H₂S, состоящая из тиосульфата натрия и цитрата аммония и железа. Образующийся сероводород визуализируется в виде колоний с чёрными центрами. Непатогенные продуценты H₂S не декарбоксилируют лизин, поэтому образующаяся кислая реакция предотвращает почернение колоний.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 56,68 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании до кипения среды.
3. Не автоклавируйте и не перегревайте среду.
4. Сразу перенесите среду на водяную баню с температурой 45–50 °C.
5. После охлаждения тщательно перемешайте среду.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Не рекомендуется готовить большие объёмы среды, требующие продолжительного нагревания.

В среде может появляться небольшой осадок. Это является свойством среды и не влияет на её рабочие характеристики.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам. Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применимым руководствам. Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения и мешающие факторы

• В среде может появляться небольшой осадок; это свойство среды, не влияющее на её рабочие характеристики.
• Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
• Некоторые штаммы Proteus могут образовывать окраску от красной до жёлтой; большинство колоний при этом развивает чёрные центры, что приводит к ложноположительным реакциям.
• Н кишечные микроорганизмы, такие как Pseudomonas и Providencia, могут образовывать красные колонии.
• S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут образовывать красные колонии без H₂S и тем самым напоминать виды Shigella.
• XLD HiVeg агар является средой общего назначения и не гарантирует рост требовательных микроорганизмов.

Меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro и только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 5,67 % масса/объём при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральную реакцию наблюдали после инкубации при 35–37 °C в течение указанного времени. Коэффициент восстановления принят равным 100 % для роста бактерий на агаре с переваром соево-казеиновой среды.