HiMedia MV030-500G Дезоксихолатный агар, HiVeg

Питательная среда HiMedia MV030-500G Дезоксихолатный агар, HiVeg, — порошкообразный агар в упаковке HDPE с конечным pH 7,3 ± 0,2. Среда предназначена для дифференциального подсчёта колиформ в молочных продуктах и выделения кишечных патогенов при хранении продукта при 10–30 °C.

Назначение

Дезоксихолатный агар HiMedia MV030-500G предназначен для прямого дифференциального подсчёта колиформ в пищевых и молочных продуктах, а также для выделения кишечных патогенов, включая Salmonella и Shigella.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 45,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте в автоклаве.
4. При восстановлении среды избегайте чрезмерного или продолжительного нагревания.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Дезоксихолатный агар приготовлен по формуле Лейфсона. Среда используется для выделения и максимального восстановления кишечных патогенов, относящихся к видам Salmonella и Shigella. Селективность среды допускает внесение достаточно больших посевных доз без риска перерастания Shigella и Salmonella другой микрофлорой.

Дезоксихолатный агар HiVeg® отличается от стандартного дезоксихолатного агара полной заменой пептонов животного происхождения на пептоны растительного происхождения, что исключает риски, связанные с BSE/TSE.

Для рутинного исследования образцов кала и мочи рекомендуется использовать эту среду совместно с другими средами, например агаром МакКонки HiVeg® (MV082) и бисмут-сульфитным агаром HiVeg® (MV027). Среду также можно использовать для штрихового посева материала из культур в селенитовом бульоне. Такой подход особенно рекомендуется для выявления Shigella и Salmonella при исследовании ректальных мазков и фекалий.

Shigella и Salmonella на этой среде образуют бесцветные колонии. Пептон HiVeg® обеспечивает среду источниками углерода, азота, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами и минеральными веществами. Колиформные и грамположительные бактерии подавляются или значительно ингибируются синтетическим моющим веществом № III и цитратом натрия. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды, а двузамещённый фосфат калия выполняет буферную функцию.

Лактоза обеспечивает дифференциацию энтеробактерий: лактозоферментирующие микроорганизмы образуют красные колонии, а нелактозоферментирующие — бесцветные. При наличии колиформ на среде формируются розовые колонии. Разложение лактозы вызывает подкисление среды вокруг соответствующих колоний, вследствие чего индикатор pH нейтральный красный изменяет цвет на красный. Такие колонии обычно окружены мутной зоной осадка дезоксихолевой кислоты, образующейся в результате подкисления среды.

Дезоксихолат натрия в кислой среде соединяется с нейтральным красным, в результате чего краситель выходит из раствора и происходит последующее осаждение дезоксихолата. Сочетание цитрата и железа оказывает выраженное гидролизующее воздействие на агар при нагревании, образуя мягкий и неэластичный гель. После автоклавирования агар становится мягким, и выполнять штриховой посев практически невозможно.

Поверхностные колонии нелактозоферментирующих микроорганизмов часто поглощают небольшое количество красителя из среды и приобретают розоватый оттенок, из-за чего такие микроорганизмы можно ошибочно принять за колиформы.

Образцы и обращение с ними

Тип образца

Тип образца: пищевые продукты и молочные продукты.

Сбор и обработка образцов

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Среда обладает высокой селективностью, поэтому её рекомендуется использовать совместно с менее селективной средой, например агаром МакКонки.
2. Среда не рекомендуется для случаев, когда ожидается низкая степень восстановления целевого патогена.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: от светло-жёлтого до розового однородного сыпучего порошка.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-оранжевого цвета.

Реакция

Реакция: для водного раствора с массово-объёмной концентрацией 4,5 % при 25 °C; pH 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, а также при использовании в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта обеспечиваются наилучшим образом при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами. При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV030-500G
• Назначение изделия: агар
• Форма: порошок
• Происхождение пептона: без компонентов животного происхождения, растительный состав
• Состав по углеводу: лактоза
• Тип продукта: HiVeg™
• Упаковка: HDPE
• Масса: 500 г
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Отличие от стандартной среды

В среде HiVeg® пептоны животного происхождения полностью заменены пептонами растительного происхождения; при этом принцип дифференциации основан на ферментации лактозы с образованием окрашенных колоний и осадка дезоксихолевой кислоты.