HiMedia MV021-500G Трехсахарный железный HiVeg агар

Сухая питательная среда HiMedia MV021-500G Трехсахарный железный HiVeg агар для идентификации грамотрицательных энтерических бацилл. Применяется для анализа ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы, а также для определения продукции сероводорода (H₂S).

Принцип измерения и интерпретация

Трехсахарный железный HiVeg® агар представляет собой модификацию среды TSI, в которой животные пептоны полностью заменены растительными, что исключает риски, связанные с БЭС/ТСЭ (губчатой энцефалопатией). Среда предназначена для идентификации семейства Enterobacteriaceae и эквивалентна по эффективности животным средам, рекомендованным APHA для анализа пищевых продуктов, молока и молочных изделий.

Механизм работы

• Питательные компоненты: HiVeg® гидролизат, HiVeg® пептон, дрожжевой экстракт и HiVeg® экстракт обеспечивают организм азотом, углеродом, длинноцепочечными аминокислотами, микроэлементами и витаминами группы B.
• Осмотический баланс: поддерживается хлоридом натрия.
• Углеводы: лактоза, сахароза и декстроза являются ферментируемыми сахарами.
• Индикация H₂S: система из тиосульфата натрия и ионов железа позволяет выявлять продукцию сероводорода. H₂S взаимодействует с солями железа, образуя нерастворимый черный осадок сульфида железа (обычно в столбике).
• pH-индикация: феноловый красный. При ферментации глюкозы образуются кислоты, меняющие цвет среды с красного на желтый.

Интерпретация результатов

• Щелочной скос (красный) / кислый столбик (желтый): ферментируется только глюкоза.
• Кислый скос (желтый) / кислый столбик (желтый): ферментируются глюкоза и сахароза, либо глюкоза и лактоза, либо все три сахара.
• Пузырьки или трещины в среде: продукция газа (CO₂).
• Черный осадок: продукция газа H₂S.

Методика проведения анализа

1. Приготовление среды: 64,52 г порошка суспендируют в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Растворение: нагревают до кипения для полного растворения компонентов.
3. Розлив: тщательно перемешивают и разливают по пробиркам.
4. Стерилизация: автоклавируют при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут. Альтернативный режим: 115 °C (давление ≈0,07 МПа / 10 psi) в течение 15 минут для достижения лучших результатов.
5. Формовка: охлаждают до 45–50 °C и позволяют среде застыть в виде скоса со столбиком длиной около 25,4 мм (1 дюйм).
6. Посев: используют метод укола (stabbing) в столбик. Запрещено использовать инокуляционную петлю для посева в столбик, так как механическое расслоение среды может привести к ложноположительному результату по газу.
7. Инкубация: пробирки закрывают неплотно для обеспечения свободного газообмена (при плотном закрытии ферментация декстрозы может привести к закислению и скоса).

Технические характеристики

Состав (г/л)

Область применения

Среда используется для анализа чистых бактериальных изолятов из проб воды и пищевых продуктов. Рекомендуется применять параллельно с мочевинным агаром или бульоном (MV112/MV111) для дифференциации видов Salmonella и Proteus.

Культуральные характеристики

Результаты после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Ограничения и предупреждения

• Некоторые представители Enterobacteriaceae и H₂S-положительные Salmonella могут давать отрицательный результат по H₂S на данной среде.
• Некоторые бактерии могут продуцировать H₂S на агаре Клиглера, но не на TSI-агаре, так как утилизация сахарозы в TSI подавляет ферментативный путь продукции H₂S.
• При работе с образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности и правила микробиологической безопасности.
• Контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать бутылку для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.