HiMedia MV021-100G Трехсахарный железный HiVeg агар

Сухая питательная среда HiMedia MV021-100G Трехсахарный железный HiVeg агар для идентификации грамотрицательных энтеробактерий. Применяется для дифференциации бактерий на основе ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы, а также по способности вырабатывать сероводород (H₂S).

Принцип измерения и интерпретация

Трехсахарный железный HiVeg агар представляет собой модификацию среды TSI, в которой животные пептоны полностью заменены растительными (HiVeg), что исключает риски, связанные с БЭС/ТСЭ (губчатой энцефалопатией). Среда эквивалентна по своим характеристикам животным средам, рекомендованным APHA для анализа пищевых продуктов, молока и молочных продуктов, а также используется в тестах на микробиологическую чистоту для подтверждения наличия Salmonellae.

Механизм работы

• Питательные вещества: HiVeg гидролизат, HiVeg пептон, экстракт дрожжей и HiVeg экстракт обеспечивают азот, углерод, длинноцепочечные аминокислоты, микроэлементы и витамины группы B.
• Осмотический баланс: поддерживается хлоридом натрия.
• Углеводы: лактоза, сахароза и декстроза являются ферментируемыми субстратами.
• Индикация H₂S: система из тиосульфата натрия и ионов железа позволяет обнаружить образование сероводорода. H₂S в кислой среде взаимодействует с ионами железа, образуя нерастворимый черный осадок сульфида железа (обычно в столбике).
• pH-индикация: феноловый красный. Ферментация глюкозы приводит к образованию кислот, и среда меняет цвет с красного на желтый.

Интерпретация результатов

• Щелочной скос (красный) / кислый столбик (желтый): ферментируется только глюкоза.
• Кислый скос (желтый) / кислый столбик (желтый): ферментируются глюкоза и сахароза, либо глюкоза и лактоза, либо все три сахара.
• Пузырьки или трещины в среде: положительная реакция на газообразование (CO₂).
• Черный осадок: положительная реакция на образование H₂S.

Методика приготовления и использования

1. Растворить 64,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешать и разлить по пробиркам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут. Примечание: для улучшения результатов возможна стерилизация при 115 °C (давление ≈0,07 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладить до 45–50 °C.
6. Залить среду в пробирки так, чтобы сформировался скос и столбик длиной около 25,4 мм (1 дюйм).

Важные указания:

• Для обеспечения щелочной реакции скоса пробку пробирки следует закрывать неплотно, чтобы обеспечить свободный обмен воздуха. При плотном закрытии ферментация декстрозы может привести к закислению и скоса, и столбика.
• При посеве нельзя использовать инокуляционную петлю; при проколе столбика механическое расщепление среды может привести к ложноположительному результату по газообразованию.
• Для дифференциации видов Salmonella и Proteus среду TSI следует использовать параллельно с мочевинным агаром или бульоном (MV112/MV111).

Технические характеристики

Состав (г/л)

Область применения

Среда предназначена для работы с чистыми бактериальными изолятами из проб воды и пищевых продуктов. При работе с пищевыми и молочными образцами, а также пробами воды, следует руководствоваться соответствующими стандартами сбора и обработки проб.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,2% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель розово-красного цвета.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Ограничения применения

1. Некоторые представители Enterobacteriaceae и продуцирующие H₂S виды Salmonella могут давать отрицательный результат по H₂S на данной среде.
2. Некоторые бактерии могут вырабатывать H₂S на агаре Клиглера, но не на TSI-агаре. Это происходит из-за того, что утилизация сахарозы в TSI подавляет ферментативный путь, приводящий к продукции H₂S.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранение готовой среды: при температуре +20…+30 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией или сожжены в соответствии с установленными протоколами работы с инфекционными материалами.