HiMedia MV016A-100G Основа HiVeg агара с бриллиантовым зеленым с 1.2% агара

Питательная среда HiMedia MV016A-100G Основа HiVeg агара с бриллиантовым зеленым с 1,2 % агара — сухая порошкообразная среда растительного происхождения для обогащения и выделения Salmonella из пищевых продуктов, молочных продуктов и проб воды. Применяется для селективного культивирования с инкубацией при 30–35 °C в течение 24–48 ч; хранение продукта осуществляется при 10–30 °C в плотно закрытой таре.

Назначение и область применения

Основа HiVeg агара с бриллиантовым зелёным с 1,2 % агара предназначена для использования в качестве среды обогащения и первичной посевной среды при выделении Salmonella из следующих типов образцов:

• пищевые продукты;
• молочные продукты;
• пробы воды.

Клинические образцы могут непосредственно высеваться на эту среду. Из-за высокой селективности рекомендуется одновременно использовать менее ингибирующую среду для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV016A-100G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Содержание агара: 1,2 %
• Наличие лактозы: да
• Тип упаковки: HDPE
• Масса: 100 г
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH: 6,9 ± 0,2 при 25 °C

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 50,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Для повышения селективности в асептических условиях добавьте восстановленное содержимое двух флаконов селективной добавки S Selective Supplement (FD068).
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Виды Salmonella вызывают различные инфекции — от лёгкого самоограничивающегося гастроэнтерита до опасной для жизни брюшнотифозной лихорадки. Наиболее распространённая форма сальмонеллёза — самоограничивающийся гастроэнтерит с лихорадкой продолжительностью менее 2 суток и диареей продолжительностью менее 7 суток.

Основа бриллиантового зелёного агара, модифицированная, первоначально была описана Kristensen и соавторами как первичная посевная среда для выделения видов Salmonella, а затем модифицирована Kauffmann. Среда применялась в методиках, рекомендованных APHA, FDA и USP.

Основа бриллиантового зелёного агара HiVeg® с 1,2 % агара отличается от основы бриллиантового зелёного агара с 1,2 % агара полной заменой пептонов животного происхождения на растительные пептоны, что исключает риски BSE/TSE, связанные с животными пептонами.

Бриллиантовый зелёный подавляет рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий. Рост Salmonella Typhi, видов Shigella, Escherichia coli, видов Proteus, видов Pseudomonas и Staphylococcus aureus в большинстве случаев ингибируется.

Пептон HiVeg® № 3 и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Феноловый красный служит кислотно-основным индикатором и придаёт жёлтую окраску колониям бактерий, ферментирующих лактозу и/или сахарозу. Бактерии, не ферментирующие лактозу, через 18–24 ч инкубации образуют колонии от белого до розовато-красного цвета.

Требования к образцам

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим указаниям.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим указаниям и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде.
2. Виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, образуя небольшие красные колонии.
3. Из-за высокой селективности среду рекомендуется использовать совместно с менее ингибирующей средой для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов.
4. Для повышения вероятности восстановления Salmonella культуры, обогащённые в селенитном бульоне (MV025) или тетратионатном бульоне HiVeg® (MV032), также высевают на основу бриллиантового зелёного агара HiVeg® с 1,2 % агара, а также на следующие среды:
   • бисмут-сульфитный агар HiVeg® (MV027);
   • SS-агар HiVeg® (MV108);
   • агар МакКонки HiVeg® (MV081).

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, сыпучий порошок от бежевого до светло-розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,2 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-коричневого цвета.

Реакция

Реакция 5,0 % масс./об. водного раствора при 25 °C:

• pH: 6,9 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч. Степень восстановления для роста бактерий на соево-казеиновой агаризованной среде принимали за 100 %.

* Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении по инструкции на этикетке, использовании до истечения срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Сухую среду хранить при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методическими указаниями.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/