HiMedia MU467-500G Агар Хектоена энтерик

Питательная селективно-дифференциальная среда HiMedia MU467-500G Агар Хектоена энтерик — порошковый агар массой 500 г для выделения и дифференциации бактерий рода Salmonella и Shigella. HiMedia MU467-500G применяется при микробиологическом контроле пищевых образцов и фармацевтической продукции, а селективность среды требует использования совместно с другими питательными средами для подтверждения результатов.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и дифференциации видов Salmonella и Shigella из фармацевтической продукции в соответствии с USP. Также среда применяется для выявления Salmonella в пищевых образцах.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Агар Хектоена энтерик представляет собой селективно-дифференциальную среду, предназначенную для выделения и дифференциации представителей видов Salmonella и Shigella от других представителей семейства Enterobacteriaceae. Среда разработана King и Metzger.

По сравнению с другими селективными средами агар Хектоена энтерик лишь незначительно подавляет рост Salmonella и Shigella, что обеспечивает высокий выход этих микроорганизмов, одновременно подавляя сопутствующие грамположительные и другие микроорганизмы.

Среда рекомендована Фармакопеей США 2019 года (USP) для анализа пищевых добавок на наличие Salmonella. Также среда рекомендована различными нормативными методиками для исследования пищевых образцов на наличие Salmonella.

Механизм действия компонентов:

• соли желчных кислот, бромтимоловый синий и кислотный фуксин подавляют рост большинства грамположительных микроорганизмов;
• лактоза, салицин и сахароза служат ферментируемыми источниками углеводов, поддерживающими рост и дифференциацию кишечных бактерий;
• повышенное содержание углеводов и пептона компенсирует ингибирующее действие солей желчных кислот и индикаторов;
• протеозный пептон обеспечивает микроорганизмы азотом, углеродом и аминокислотами, необходимыми для роста;
• дрожжевой экстракт служит источником витаминов;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды;
• тиосульфат натрия служит источником серы;
• агар Хектоена энтерик позволяет выявлять образование сероводорода H₂S, при котором отдельные участки среды окрашиваются в чёрный цвет;
• цитрат аммонийного железа служит источником железа, вызывает образование сероводорода из тиосульфата натрия и способствует визуализации H₂S за счёт реакции с сероводородом с образованием чёрного осадка.

Enterobacteriaceae, способные ферментировать один или несколько углеводов, формируют колонии жёлтого или лососево-оранжевого цвета. Например, Klebsiella pneumoniae, ферментирующая лактозу, образует колонии соответствующего цвета.

Неферментирующие микроорганизмы формируют сине-зелёные колонии. Микроорганизмы, восстанавливающие серу до сероводорода, образуют чёрные колонии либо сине-зелёные колонии с чёрным центром. Salmonella восстанавливает серу до сероводорода с образованием чёрного осадка. Micrococcus luteus не растёт на этой среде.

Подготовка среды

1. Приготовьте суспензию из 72,66 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте автоклавированием.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Образцы

Тип образца

Пищевые образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов используйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При обращении с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Дополнительная инкубация улучшает дифференциацию между Salmonella и Shigella.
2. Виды Proteus могут быть похожи на Salmonella или Shigella, поэтому для подтверждения необходимо выполнить дополнительные исследования.
3. Поскольку среда является селективной, её необходимо использовать совместно с другими питательными средами.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок кремового или жёлтого цвета с коричневатым оттенком.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,4%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зелёного цвета.

Испытание на стимуляцию роста

Стимуляцию роста наблюдали в соответствии с USP после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч. Степень восстановления принимается равной 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Культуральные характеристики