Селективная агаровая питательная среда HiMedia MU2089-500G «Селективный агар для Burkholderia cepacia» предназначена для выделения микроорганизмов из фармацевтической продукции и клинических образцов; масса упаковки — 500 г. Среда применяется после первичного обогащения образца в соево-казеиновой переваренной среде, а готовую чашечную среду хранят при 2–8 °C.

Назначение и область применения

Селективный агар HiMedia MU2089-500G рекомендован для выделения Burkholderia cepacia из:

• фармацевтических препаратов;
• респираторных выделений пациентов с муковисцидозом;
• других не связанных с клиникой образцов;
• клинических образцов;
• фармацевтических образцов.

Методика предназначена для применения в соответствии с требованиями Фармакопеи США (USP) к микробиологическому исследованию нестерильных продуктов на комплекс Burkholderia cepacia.

Состав

Состав, г/л:

Casitose — казеин-пептон.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 50,58 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа; ≈1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки BCSA (FD361).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Burkholderia cepacia — оппортунистический патоген, способный вызывать лёгочные инфекции у пациентов с муковисцидозом. Виды Burkholderia cepacia представляют собой грамотрицательные бактерии палочковидной формы. Микроорганизм может вызывать синдром Burkholderia cepacia — нейтрализующую пневмонию, связанную с лихорадкой и способную приводить к быстрому летальному ухудшению состояния.

Виды Burkholderia cepacia могут вызывать тяжёлые инфекции у пациентов с муковисцидозом и лиц с ослабленным иммунитетом. B. cepacia сложно выделить на обычно используемых лабораторных средах, например на агаре МакКонки, поскольку микроорганизм растёт медленно и обычно подавляется более быстро растущими Escherichia coli, Staphylococcus aureus и Pseudomonas aeruginosa. Агар для Burkholderia cepacia разработан на основе среды PC, первоначально предложенной Gilligan. Среда показала более высокую пригодность для выращивания B. cepacia по сравнению с агаром МакКонки.

Burkholderia cepacia способны преодолевать действие антимикробных консервирующих систем и антисептиков, а также расти в консервированных водных жидкостях для приёма внутрь и препаратах для местного применения. Среда рекомендована для выявления Burkholderia cepacia в фармацевтической продукции.

Casitose и дрожжевой экстракт обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами.

Кристаллический фиолетовый и антимикробные вещества выполняют функцию селективных агентов. Кристаллический фиолетовый и ванкомицин подавляют грамположительные кокки, включая энтерококки и стафилококки. Полимиксин B и гентамицин подавляют грамотрицательные бактерии.

B. cepacia метаболизирует пируват с образованием щелочных конечных продуктов. Сахароза и лактоза являются сбраживаемыми углеводами. Индикатор феноловый красный изменяет цвет с розово-оранжевого на розово-красный при щелочном pH.

Методика проведения анализа

Образец сначала обогащают в соево-казеиновой переваренной среде, после чего высевают на селективный агар для Burkholderia cepacia.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям.

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. На среде могут расти другие бактерии, устойчивые к селективным агентам.
2. Для полной идентификации необходима дополнительная биохимическая характеристика.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным методическим рекомендациям.
• Руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,4%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется оранжевый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 5,06%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,8 ± 0,3.

pH

Диапазон pH: 6,50–7,10.

Условия определения культуральных характеристик

Культуральную реакцию наблюдали после инкубации при 30–35 °C в течение 48–72 ч. Коэффициент восстановления принимают за 100 % относительно роста бактерий на соево-казеиновой переваренной агаризованной среде.

Ростовые свойства

Рост микроорганизмов, сопоставимый с ростом, ранее полученным на испытанной и одобренной партии среды, должен наблюдаться при заданной температуре не более чем за минимальный указанный период времени при посеве 100 КОЕ: 30–35 °C в течение не более 48 ч.

Индикаторные свойства

Колонии должны быть сопоставимы по внешнему виду и индикаторной реакции с колониями, ранее полученными на испытанной и одобренной партии среды, при заданной температуре в течение периода времени в установленном диапазоне при посеве не более 100 КОЕ: 30–35 °C в течение 48–72 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестового микроорганизма не должен наблюдаться при заданной температуре в течение не менее максимального указанного периода времени при посеве не менее 100 КОЕ: 30–35 °C в течение не менее 72 ч.