Псевдомонадный агар HiMedia MU119 (уп/500 гр)

Питательная среда — псевдомонадный агар HiMedia MU119 (уп/500 гр) производства HiMedia для выявления пиоцианина, образуемого видами Pseudomonas. Псевдомонадный агар применяется при микробиологическом контроле фармацевтических образцов; приготовленная среда имеет pH 7,00–7,40.

Назначение

Псевдомонадный агар HiMedia MU119 предназначен для выявления продукции пиоцианина видами Pseudomonas в соответствии с методикой Американской фармакопеи (USP). Среда применяется для анализа фармацевтических образцов и микробиологических предельных испытаний фармацевтических и других биологических препаратов.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Псевдомонадный агар основан на составе, описанном King и соавторами, и рекомендован Американской фармакопеей для выявления пиоцианина — водорастворимого пигмента, образуемого видами Pseudomonas в клинических образцах, включая кал, материал из ран и мочу.

Виды Pseudomonas относятся к распространённым патогенным микроорганизмам и являются значимой причиной внутрибольничных инфекций, кожных инфекций и инфекций ожоговых поверхностей. Штаммы Pseudomonas могут продуцировать феназиновые пигменты:

• пиоцианин — сине-зелёный окислительно-восстановительно активный вторичный метаболит;
• пиорубин — ржаво-коричневый пигмент;
• оксифеназин — продукт распада пиоцианина;
• пиоовердин — водорастворимый жёлто-зелёный пигмент, также известный как флуоресцеин.

Пиоцианин может выделяться в значительных количествах в мокроте пациентов с муковисцидозом при инфекции, вызванной Pseudomonas. Псевдомонадный агар усиливает образование пиоцианина и/или пиорубина и снижает образование флуоресцеина.

Механизм действия компонентов среды:

• желатиновый пептон обеспечивает Pseudomonas необходимыми питательными веществами;
• глицерин, добавляемый при приготовлении среды, служит источником углерода и энергии для клеток;
• пиоцианин диффундирует из колоний Pseudomonas в агар и вызывает синее окрашивание;
• сульфат калия и хлорид магния усиливают образование пиоцианина и подавляют образование флуоресцеина;
• низкое содержание фосфора в среде также способствует ингибированию образования флуоресцеина.

Некоторые штаммы Pseudomonas продуцируют небольшое количество флуоресцеина, что приводит к сине-зелёному окрашиванию. Штаммы Pseudomonas aeruginosa, не образующие пиоцианин, на этой среде не выявляются. Образование других пигментов может маскировать наличие пиоцианина.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 46,4 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо используйте валидированный цикл стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Тип образца

Тип образца: фармацевтические образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.

Культуральные характеристики

Ростовые свойства определяют в соответствии с гармонизированной методикой USP. Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 33–37 °C в течение не менее 3 суток. Степень восстановления принимают равной 100 % от роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Примечание: * соответствующие номера WDCM.

^ Ранее обозначался как Pseudomonas aeruginosa.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого препарата: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого препарата: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить препарат в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухое, вентилируемое, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Ограничения применения

Среда предназначена для общего применения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов. Штаммы Pseudomonas aeruginosa, не продуцирующие пиоцианин, на этой среде не выявляются. Наличие других пигментов может маскировать пиоцианин, а продукция небольшого количества флуоресцеина некоторыми штаммами может вызывать сине-зелёное окрашивание.

Меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо утилизировать безопасным способом после автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительное техническое отличие

В отличие от универсальных питательных сред, псевдомонадный агар MU119 содержит сульфат калия, хлорид магния и пониженное количество фосфора для усиления образования пиоцианина и подавления продукции флуоресцеина.