HiMedia MU021-500G Трехсахарный железный агар

Сухая питательная среда HiMedia MU021-500G Трехсахарный железный агар для идентификации грамотрицательных энтерических бацилл. Применяется для дифференциации микроорганизмов на основе ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы, а также по способности вырабатывать сероводород (H₂S) в соответствии с требованиями Фармакопеи США (USP).

Принцип измерения и интерпретация

Трехсахарный железный агар (TSI) предназначен для идентификации семейства Enterobacteriaceae. Среда содержит три ферментируемых углевода: декстрозу, лактозу и сахарозу.

Механизм работы

• Источники питания: Триптон и пептон обеспечивают азотистые соединения, серу, микроэлементы и витамины комплекса B. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
• Индикация pH: Феноловый красный служит индикатором. Бактерии, ферментирующие декстрозу, вырабатывают кислоты, меняя цвет среды с красного на жёлтый. В столбике (анаэробная зона) вырабатывается больше кислоты, чем в скосе (аэробная зона).
• Дифференциация сахаров: Если бактерия ферментирует только декстрозу, в скосе происходит окислительное декарбоксилирование пептона с образованием щелочных продуктов, которые нейтрализуют кислоту; в результате скос остаётся красным (щелочным), а столбик становится жёлтым (кислым). Бактерии, ферментирующие лактозу и/или сахарозу, вырабатывают достаточное количество кислоты, чтобы скос и столбик оставались жёлтыми.
• Газообразование: Продукция CO₂ проявляется в виде трещин или пузырьков в толще агара.
• Продукция H₂S: Тиосульфат натрия служит субстратом для фермента тиосульфатредуктазы. В кислой среде H₂S взаимодействует с ионами железа, образуя нерастворимый чёрный осадок сульфида железа (обычно в столбике).

Резюме реакций

• Щелочной скос / кислый столбик: ферментация только декстрозы.
• Кислый скос / кислый столбик: ферментация декстрозы и сахарозы, либо декстрозы и лактозы, либо всех трёх сахаров.
• Пузырьки или трещины: образование газа.
• Чёрный осадок: образование H₂S.

Для дифференциации видов Salmonella и Proteus рекомендуется использовать TSI-агар параллельно с мочевинным агаром или бульоном (M112/M111).

Методика приготовления и использования

1. Приготовление: суспендировать 59,42 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Растворение: нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Розлив: тщательно перемешать и разлить по пробиркам.
4. Стерилизация: автоклавировать при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Формовка: дать среде застыть в виде скоса со столбиком длиной около 25,4 мм (1 дюйм).
6. Посев: использовать чистые изоляты бактерий. Для вязких фармацевтических материалов применять соответствующие техники пробоподготовки.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

Контроль качества и эффективность

Внешний вид и свойства

• Вид порошка: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,3% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель розово-красного цвета.
• pH готовой среды: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 часов.

Ограничения применения

Некоторые представители Enterobacteriaceae и штаммы Salmonella, продуцирующие H₂S, могут давать отрицательный результат на TSI-агаре. Это связано с тем, что утилизация сахарозы в данной среде может подавлять ферментативный путь, приводящий к образованию H₂S. В таких случаях может наблюдаться продукция H₂S на агаре Клиглера, но не на TSI.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать крышку во избежание образования комков.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные среды подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию в соответствии с правилами работы с инфекционными материалами.