HiMedia MU021-100G Трехсахарный железный агар

Сухая питательная среда HiMedia MU021-100G Трехсахарный железный агар для идентификации грамотрицательных энтеробактерий на основе ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы. Применяется в фармацевтическом тестировании и микробиологическом анализе для определения способности микроорганизмов вырабатывать сероводород (H₂S) в соответствии с требованиями Фармакопеи США (USP).

Принцип измерения и интерпретация

Трехсахарный железный агар (TSI) предназначен для идентификации семейства Enterobacteriaceae. Среда содержит три ферментируемых углевода: лактозу, сахарозу и декстрозу (глюкозу).

• Механизм реакции: Бактерии, ферментирующие декстрозу, вырабатывают кислоты, что изменяет цвет среды с красного на жёлтый. В области столбика (анаэробная зона) образуется больше кислот, чем в области скоса (аэробная зона). При этом бактерии могут образовывать щелочные продукты за счет окислительного декарбоксилирования пептона, которые нейтрализуют кислоты в области скоса.
• Индикация pH: Феноловый красный служит индикатором pH.
• Определение H₂S: Тиосульфат натрия служит субстратом для фермента тиосульфатредуктазы. В кислой среде тиосульфат восстанавливается до сероводорода (H₂S), который взаимодействует с ионами железа, образуя нерастворимый чёрный осадок сульфида железа (обычно в столбике).
• Определение газа: Газообразование (CO₂) фиксируется по появлению пузырьков или трещин в агаре.

Интерпретация результатов

• Щелочной скос (красный) / кислый столбик (жёлтый): ферментируется только декстроза.
• Кислый скос (жёлтый) / кислый столбик (жёлтый): ферментируются декстроза и сахароза, либо декстроза и лактоза, либо все три сахара.
• Пузырьки или трещины: продукция газа.
• Чёрный осадок: продукция H₂S.

Для дифференциации видов Salmonella и Proteus рекомендуется использовать TSI-агар параллельно с мочевинным агаром или бульоном (например, |M112| / |M111|).

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендировать 59,42 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешать и разлить по пробиркам.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
5. Охладить, сформировав скос с длиной столбика около 25,4 мм (1″).

Процедура анализа

• Тип образца: чистая бактериальная культура.
• Посев: инокулировать среду.
• Инкубация: 24–48 часов при температуре 30–35 °C.

Технические характеристики

• Вес: 100 г
• Внешний вид: светло-жёлтый или розовый гомогенный свободнотекущий порошок
• Желирование: плотный гель (сопоставимо с 1,3 % агаром)
• Цвет и прозрачность готовой среды: розово-красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 7,10–7,50
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Форма выпуска: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 часов.

Ограничения и предостережения

Некоторые представители Enterobacteriaceae и H₂S-положительные Salmonella могут не проявлять активность по H₂S на TSI-агаре. Это может быть связано с тем, что утилизация сахарозы в данной среде подавляет ферментативный путь, приводящий к продукции H₂S (в то время как на агаре Клиглера реакция может быть положительной).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены путем автоклавирования или инсинерации в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.