HiMedia MU016-100G Агар с бриллиантовым зеленым

Питательная селективная агаровая среда HiMedia MU016-100G Агар с бриллиантовым зеленым выпускается в виде порошка массой 100 г. Среда предназначена для первичного выделения видов Salmonella, кроме Salmonella Typhi, из фекалий, пищевых, молочных и фармацевтических образцов; из-за высокой селективности её рекомендуется применять совместно с менее ингибирующей средой.

Назначение

Агар с бриллиантовым зеленым предназначен для селективного выделения сальмонелл, кроме Salmonella Typhi, из следующих образцов:

• пищевые продукты и молочные образцы;
• фекалии;
• фармацевтические образцы;
• клинический материал.

Среда применяется как первичная чашечная среда для выделения видов Salmonella, при испытании микробиологических пределов, а также совместно с новобиоцином для анализа пищевых и фармацевтических продуктов. Ростовые свойства среды проверяются в соответствии с требованиями USP.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 58,09 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар с бриллиантовым зелёным первоначально был описан Kristensen и соавторами как среда для дифференциации паратифа B и других грамотрицательных кишечных бактерий. Позднее Kauffmann модифицировал среду для выделения Salmonella из образцов фекалий.

Сочетание пептона, триптона и дрожжевого экстракта обеспечивает питательную основу среды и поставляет аминокислоты и длинные пептидные цепи. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Лактоза и сахароза служат ферментируемыми источниками углеводов. Феноловый красный является кислотно-основным индикатором: бактерии, ферментирующие лактозу и/или сахарозу, вызывают появление жёлтой окраски.

Бриллиантовый зелёный подавляет рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий. В основном подавляется рост следующих микроорганизмов:

• Salmonella Typhi;
• виды Shigella;
• Escherichia coli;
• виды Proteus;
• виды Pseudomonas;
• Staphylococcus aureus.

Высокая селективность среды позволяет анализировать образцы с большой посевной дозой и сильно загрязнённые образцы. Для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов среду рекомендуется использовать вместе с менее ингибирующей средой. Культуры, обогащённые в селенитном или тетратионатном бульоне, часто высевают одновременно на агар с бриллиантовым зелёным, бисмут-сульфитный агар, SS-агар и агар МакКонки.

Неферментирующие лактозу бактерии формируют белые или розовато-красные колонии через 18–24 ч инкубации. Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде. Кроме того, виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, образуя мелкие красные колонии.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Несмотря на селективность в отношении Salmonella, на среде могут расти другие представители семейства Enterobacteriaceae.
2. Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде.
3. Виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, образуя мелкие красные колонии.
4. Предположительные изоляты Salmonella необходимо дополнительно подтверждать.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-коричневого цвета.

pH

6,70–7,10.

Испытание стимуляции роста

Стимуляция роста подтверждена в соответствии с USP.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч. Скорость восстановления принимают за 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.