Агар Xylose Lysine Deoxycholate в чашке HiMedia MPH031-50PT (50 чашек)

Готовая селективно-дифференциальная агаровая среда Агар Xylose Lysine Deoxycholate в чашке HiMedia MPH031-50PT (50 чашек) предназначена для выделения и количественного определения бактерий рода Salmonella. Среду применяют для микробиологического контроля фармацевтических образцов; посевная доза при внесении на чашку составляет 50–100 КОЕ.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов рода Salmonella из фармацевтических препаратов. Применяется при испытаниях на микробиологическую чистоту по гармонизированной методике фармакопей USP/EP/BP/JP/IP.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для достижения заданных характеристик среды.

Принцип действия

Enterobacteriaceae — семейство грамотрицательных неспорообразующих палочковидных бактерий, включающее более 100 видов, обычно обитающих в кишечнике человека и животных. Представителей нормальной кишечной микрофлоры называют колиформными бактериями. К клинически значимым родам Enterobacteriaceae относятся Cedecea, Citrobacter, Edwardsiella, Enterobacter, Escherichia, Ewingella, Hafnia, Klebsiella, Kluyvera, Proteus, Salmonella, Shigella и Yersinia.

Бактерии рода Salmonella — одна из наиболее сложных групп Enterobacteriaceae. Инфицирование человека чаще всего происходит при употреблении пищи, воды или молока, загрязнённых выделениями человека или животных. Для селективного выделения и идентификации кишечных палочковидных бактерий, включая Salmonella, разработаны различные питательные среды.

Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (Xylose Lysine Deoxycholate Agar) — селективная и дифференциальная среда, разработанная Тейлором для выделения и идентификации кишечных патогенов, в особенности Shigella, из образцов кала. Среду также применяют при фармацевтических испытаниях и контроле нестерильной продукции для выявления или подтверждения отсутствия Salmonella после обогащения в бульоне для обогащения Salmonella по Раппапорту—Вассилиадису (MH1491), согласно гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP.

Дезоксихолат натрия, цитрат аммония железа и тиосульфат натрия являются селективными компонентами, подавляющими рост грамположительных микроорганизмов. Дрожжевой экстракт обеспечивает микроорганизмы необходимыми питательными веществами и факторами роста.

Ксилоза, сахароза и лактоза служат сбраживаемыми сахарами. Ксилозу сбраживает почти большинство кишечных бактерий, за исключением Shigella; это позволяет дифференцировать Shigella и Salmonella. Salmonella метаболизирует ксилозу и декарбоксилирует лизин, в результате чего pH становится щелочным и возникает реакция, имитирующая реакцию Shigella. Чтобы предотвратить такую реакцию у колиформных бактерий, положительных по лизину, в среду добавлены повышенные количества лактозы и сахарозы: образование кислоты препятствует декарбоксилированию лизина непатогенными бактериями, продуцирующими H₂S.

Тиосульфат натрия способствует реактивации серосодержащих соединений и предотвращает их высыхание при хранении. Он также служит субстратом для фермента тиосульфатредуктазы, расщепляющей тиосульфат с образованием H₂S. Тиосульфат и цитрат аммония железа используются в качестве индикаторов H₂S. Тиосульфат натрия также инактивирует галогены, соединения ртути и альдегиды, что позволяет снизить возможное токсическое воздействие этих веществ в исследуемой пробе при испытаниях на микробиологическую чистоту.

Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Феноловый красный служит индикатором pH. Сбраживание сахаров сопровождается образованием кислот, из-за чего индикатор меняет окраску. При длительной инкубации цвет колоний и среды может изменяться с красного на жёлтый. Образование сероводорода при щелочных условиях приводит к появлению чёрных центров в колониях; подкисление среды вследствие сбраживания углеводов может подавлять эту реакцию. В щелочных условиях окраска среды снова становится красной.

Среда предназначена для скрининга образцов со смешанной кишечной микрофлорой: рост других видов, даже обильный, не препятствует обнаружению Salmonella и Shigella.

Методика проведения анализа

1. Асептически нанесите посевную дозу 50–100 КОЕ на чашку одним из способов: штриховым посевом, инокуляцией или поверхностным распределением.
2. Для фармацевтических образцов выполняйте отбор и обработку проб в соответствии с применимыми методиками и руководствами.
3. После использования автоклавируйте загрязнённые материалы перед утилизацией.

Тип образца

Фармацевтические образцы.

Контроль качества

• Внешний вид: стерильный ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар в одноразовых чашках диаметром 90 мм; поверхность гладкая, чёрные частицы, пузырьки и трещины отсутствуют.
• Цвет среды: красный.
• Объём среды: 25 мл в одноразовой чашке диаметром 90 мм.
• pH: 7,20–7,60.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Ростовые характеристики

Ростовые характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение указанного времени. За 100 % принимают восстановление бактерий на соево-казеиновом агаре.

Испытание на стимуляцию роста проводят по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч. За 100 % принимают восстановление бактерий на соево-казеиновом агаре, а грибов — на агаре Сабуро с декстрозой.

Индикаторные свойства

В течение заданного периода при указанной температуре колонии должны быть сопоставимы по внешнему виду и индикаторной реакции с колониями, полученными на ранее испытанной и одобренной серии среды. Испытание проводят с посевной дозой ≤100 КОЕ при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Ингибирующие свойства

При заданной температуре и посевной дозе ≤100 КОЕ рост тест-микроорганизма должен отсутствовать в течение периода не меньше максимального установленного времени испытания; для приведённых ниже культур — при 30–35 °C в течение 72 ч.