Готовая питательная среда агар R-2A в чашке (γ-облучённый) (тройной упаковка) HiMedia MP962GT-20PT (20 чашек) — стерильные чашки диаметром 90 мм с 30 мл среды. Среда предназначена для определения гетеротрофного числа микроорганизмов в пробах воды при увеличенной продолжительности инкубации.

Назначение

Среду применяют для определения гетеротрофного числа микроорганизмов в пробах воды, в том числе для выявления клеток, повреждённых или находящихся в стрессовом состоянии после обработки воды. Предназначена для проб воды.

Состав

Состав среды, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для достижения заданных характеристик среды.

Ациказа эквивалентна кислотному гидролизату казеина.

Принцип действия и интерпретация результатов

Гетеротрофное чашечное определение (HPC), ранее называвшееся стандартным чашечным подсчётом, используют для оценки количества живых гетеротрофных бактерий в воде и отслеживания изменений при водоподготовке, в распределительных системах и плавательных бассейнах. Агар R-2A рекомендован APHA для определения HPC методом заливных чашек, поверхностного посева или мембранной фильтрации. Состав среды разработан по методу Reasoner и Geldreich.

Клетки, повреждённые или находящиеся в стрессовом состоянии после водоподготовки, могут не развиваться на богатых питательными веществами средах: быстрорастущие микроорганизмы подавляют их рост. Использование среды с низким содержанием питательных веществ и увеличенной продолжительностью инкубации позволяет таким клеткам развиваться. Многие бактерии из природных вод с ограниченным содержанием питательных веществ лучше растут на средах с низким уровнем питательных веществ и при температуре ниже обычной лабораторной температуры инкубации 35–37 °C.

Ациказа, протеозный пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азота, углеродных соединений, витаминов, аминокислот и минеральных веществ. Декстроза (глюкоза) является источником энергии. Растворимый крахмал способствует восстановлению повреждённых клеток, поглощая токсичные побочные продукты метаболизма; пируват натрия повышает восстановление клеток, находящихся в стрессовом состоянии. Сульфат магния служит источником двухвалентных катионов и сульфата. Гидрофосфат калия двузамещённый используют для поддержания pH среды. Результаты подсчёта выражают в колониеобразующих единицах (КОЕ) на объём пробы.

Методика проведения анализа

1. Асептически нанесите посевной материал на поверхность чашки штриховым методом, инокуляцией или поверхностным распределением. Посевная доза: 50–100 КОЕ.
2. Для определения HPC используйте метод заливных чашек, поверхностного посева или мембранной фильтрации.
3. Инкубируйте согласно применяемой методике. Для медленнорастущих микроорганизмов требуется более длительная инкубация. При анализе проб воды, отобранных в полевых условиях, рекомендуется продлить инкубацию до 7 суток, чтобы подтвердить отсутствие микроорганизмов.

Применение и ограничения

• Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к росту и могут демонстрировать различные характеристики роста на среде.
• Каждую серию среды проверяют на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для других микроорганизмов пользователю рекомендуется валидировать пригодность среды с учётом конкретных требований.
• Для медленнорастущих микроорганизмов требуется более длительная инкубация, чем предусмотрено стандартной методикой.
• Среда предназначена для проб воды и восстановления клеток, находящихся в стрессовом состоянии или повреждённых.
• Для уменьшения конденсации рекомендуется хранить чашки при 24–30 °C.

Сбор и обработка проб

Для проб воды соблюдайте подходящие методы отбора и обработки проб, руководствуясь применимыми рекомендациями и местными стандартами. После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать в автоклаве.

Контроль качества

• Внешний вид: стерильный агар R-2A в одноразовых чашках диаметром 90 мм; поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков; γ-облучение, тройная упаковка.
• Цвет среды: светло-жёлтый.
• Количество среды: 30 мл в одноразовой чашке диаметром 90 мм.
• pH: 7,00–7,40.
• Доза облучения: 13,00–20,00 кГр.
• Контроль стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики оценивали на стандартных культурах ATCC после инкубации при 30–35 °C в течение 24–72 ч. Для проб воды, отобранных в полевых условиях, рекомендуется инкубировать до 7 суток, чтобы подтвердить отсутствие микроорганизмов.

• Числа в скобках соответствуют номерам WDCM.
  ** Bacillus spizizenii ранее назывался Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Aspergillus brasiliensis ранее назывался Aspergillus niger.

$ Pseudomonas paraeruginosa ранее назывался Pseudomonas paraeruginosa.

Условия хранения и срок годности

При получении хранить при 20–30 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

Перед вскрытием упаковки прочитайте этикетку. Используйте защитные перчатки, одежду, очки и средства защиты лица. При работе с пробами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики и стандартные меры предосторожности, установленные применимыми рекомендациями. Указания по безопасности также приведены в паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием. Соблюдайте установленные лабораторные процедуры утилизации инфекционных материалов. Материалы, контактировавшие с пробой, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методами.