Агар TCBS в чашке HiMedia MP870-50PT (50 чашек)

Готовая питательная среда Агар TCBS в чашке HiMedia MP870-50PT (50 чашек) имеет конечный pH 8,8 ± 0,2. Агар используют для селективного выделения Vibrio cholerae и других энтеропатогенных вибрионов; среда не подходит для оксидазного тестирования вибрионов.

Назначение

Среда предназначена для селективного выделения Vibrio cholerae и других энтеропатогенных видов Vibrio из клинических, пищевых и водных проб.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована с учётом параметров эффективности. Желчь эквивалентна экстракту бычьей желчи (Oxgall).

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар TCBS разработан Кобаяси на основе селективной среды Наканиси. Среда предназначена для выделения V. cholerae и V. parahaemolyticus; большинство вибрионов образуют крупные колонии, морфология которых может различаться. Щелочной pH способствует выделению V. cholerae. Для повышения селективности в состав данной селективной разновидности агара TCBS дополнительно входит холат натрия.

Специальный пептон и дрожжевой экстракт служат источниками азотсодержащих и углеродсодержащих соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов группы B и других необходимых для роста питательных веществ. Желчь и цитрат натрия подавляют рост грамположительных бактерий и колиформных бактерий.

Тиосульфат натрия служит источником серы, а цитрат железа позволяет выявлять образование сероводорода (H₂S). Сахароза добавлена как ферментируемый углевод. Бромтимоловый синий и тимоловый синий являются индикаторами pH. Вибрионы, способные утилизировать сахарозу, образуют жёлтые колонии.

• Штаммы V. cholerae образуют жёлтые колонии вследствие ферментации сахарозы.
• V. alginolyticus также образует жёлтые колонии.
• V. parahaemolyticus не ферментирует сахарозу и образует сине-зелёные колонии; аналогичная окраска характерна для V. vulnificus.
• Ферментирующие сахарозу виды Proteus могут образовывать жёлтые колонии.
• Некоторые штаммы V. cholerae из-за замедленной ферментации сахарозы могут образовывать зелёные или бесцветные колонии.
• Иногда сине-зелёные колонии образуют изоляты Pseudomonas и Aeromonas.
• Колонии на агаре TCBS, не образующие H₂S, можно рассматривать как предположительно положительные на Vibrio; для полной идентификации необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.

Среда также рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для селективного выделения V. cholerae и V. parahaemolyticus. Для выделения V. cholerae обычно применяют обогащение в щелочной пептонной воде (M618) с последующим высевом на агар TCBS.

Методика работы

1. Асептически нанесите исследуемый инокулят на чашку одним из способов: штриховым высевом, инокуляцией или поверхностным распределением.
2. Рекомендуемая посевная доза — 50–100 КОЕ.
3. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Для клинических проб следует применять установленные методы обращения с материалом. При сборе и обработке водных и пищевых проб необходимо соблюдать соответствующие руководства и местные нормы. Материалы, загрязнённые после использования, перед утилизацией стерилизуют в автоклаве.

Контроль качества

Внешний вид: стерильный агар TCBS в одноразовых чашках Петри диаметром 90 мм; поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков.

Цвет среды: голубовато-зелёный.

Объём среды: 25 мл в чашке диаметром 90 мм.

pH: 8,60–9,00.

Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление, % | Цвет колоний | | --- | --- |