Готовая питательная среда Агар MYP в чашке (100mm чашка) HiMedia MP636C-20PT (20 чашек) — стерильные чашки диаметром 100 мм, содержащие по 40 мл агара. Среда предназначена для выделения и идентификации патогенных стафилококков и бактерий рода Bacillus, включая дифференциацию Bacillus cereus по ферментации маннита и активности лецитиназы.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для выделения и идентификации патогенных стафилококков и бактерий рода Bacillus. Агар MYP применяют для выделения и подсчёта Bacillus cereus в пищевых продуктах.

Bacillus cereus широко распространён в почве, воде, связанной с растительностью, и пыли. Его выделяли из овощей, мяса, зерновых, пастеризованного свежего и сухого молока, а также переработанных пищевых продуктов. При благоприятных условиях бактерия размножается и может вызывать желудочно-кишечные заболевания. Она связана с двумя формами пищевого отравления: рвотной и диарейной. Рвотную форму вызывает высокостабильный токсин, сохраняющий активность при высокой температуре, воздействии трипсина и пепсина, а также при экстремальных значениях pH. Диарейную форму вызывает энтеротоксин, чувствительный к нагреванию и кислой среде.

Принцип дифференциации

Ключевой реакцией для дифференциальной идентификации B. cereus — наиболее часто встречающегося и значимого для клинических лабораторий вида — среди большинства других бактерий рода Bacillus является активность лецитиназы. Предположительную идентификацию неизвестного изолята как Bacillus cereus проводят, если он продуцирует лецитиназу, с учётом также морфологии колоний, гемолитической реакции и подвижности.

Среду Маннитол-Яичный желток-Полимиксин (MYP) сформулировали Моссель и соавторы; APHA рекомендует её для выделения и подсчёта B. cereus в пищевых продуктах. При высоком содержании бактерии в некоторых продуктах её метаболиты могут вызывать симптомы пищевого отравления.

Среда дифференцирует B. cereus и другие бактерии по активности лецитиназы, ферментации маннита и устойчивости к полимиксину. Пептон и экстракт HM служат источниками азота. Ферментацию маннита выявляют по изменению окраски фенолового красного: образование кислоты придаёт колониям, ферментирующим маннит, жёлтый цвет. Добавленная эмульсия яичного желтка помогает выявлять колонии, продуцирующие лецитиназу; вокруг таких колоний образуется зона белого осадка. Добавление селективной добавки PolyB (FD003) помогает ограничить рост грамотрицательных бактерий, таких как Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa.

Среда позволяет дифференцировать B. cereus от других видов Bacillus по неспособности ферментировать маннит и слабому спорообразованию. B. cereus расщепляет компоненты яичного желтка и образует типичные колонии бациллярной формы.

Состав

Состав среды, г/л:

Формула скорректирована и стандартизована для обеспечения заданных характеристик.

Эквивалент мясного экстракта.

Методика посева

1. В асептических условиях нанесите на поверхность чашки посевной материал в количестве 50–100 КОЕ: выполните штриховой посев, инокуляцию или поверхностное распределение.

Типы образцов и обращение с ними

Типы образцов: клинические образцы (фекалии), пищевые продукты, вода.

• Для клинических образцов соблюдайте установленные методики обращения с материалом.
• Отбор и обработку пищевых образцов выполняйте согласно применимым руководствам.
• Отбор и обработку проб воды проводите в соответствии с руководствами и местными стандартами.
• После использования загрязнённые материалы необходимо автоклавировать перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид: стерильный агар MYP в одноразовых чашках диаметром 100 мм; поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков.

Цвет среды: светло-оранжевый.

Количество среды: 40 мл в одноразовой чашке диаметром 100 мм.

pH: 6,90–7,30.

Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 32 °C в течение 18–40 ч.

• Звёздочкой обозначены соответствующие номера WDCM.
  ** Ранее назывался Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Ограничения метода

1. Потребности отдельных микроорганизмов в условиях роста различаются, поэтому характер роста на среде может варьировать.
2. Если неизвестный изолят продуцирует лецитиназу, для предположительной идентификации Bacillus cereus дополнительно оценивают морфологию колоний, гемолитическую реакцию и подвижность.
3. Для полной идентификации необходимы дополнительные серологические и биохимические исследования.

Условия хранения и срок годности

Хранить при температуре 2–8 °C. Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Для достижения заявленных характеристик использовать среду в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности и утилизация

Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального применения. Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. Используйте защитные перчатки, одежду, очки и средства защиты лица. При работе с образцами и культурами соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности для клинических образцов. При необходимости руководствуйтесь паспортами безопасности.

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием. Инфекционные материалы утилизируйте согласно установленным лабораторным процедурам. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, обеззараживайте и утилизируйте в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Оценка характеристик среды

Ожидаемые характеристики обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке и хранении при рекомендованной температуре в пределах срока годности.