Агар Bile Esculin Azide в чашке HiMedia MP493-50PT (50 чашек)

Готовая селективная питательная среда Агар Bile Esculin Azide в чашке HiMedia MP493-50PT (50 чашек) предназначена для выделения и предварительной идентификации фекальных стрептококков. Среда применяется при анализе пищевых продуктов, молочной продукции и воды; для подтверждения идентификации требуются дополнительные биохимические тесты.

Назначение

Среда предназначена для выделения и предварительной идентификации фекальных стрептококков, включая энтерококки, в пищевых продуктах, молочной продукции и воде.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для достижения заданных характеристик. Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту; желчь эквивалентна бычьей желчи.

Принцип действия

Стрептококки группы D имеют в клеточной стенке групповой антиген липотейхоевой кислоты. Бывшие виды группы D, широко представленные в нормальной микрофлоре желудочно-кишечного тракта человека, относят к фекальным стрептококкам или энтерококкам.

Энтерококки и стрептококки группы D гидролизуют эскулин до эскулетина и декстрозы. Эскулетин реагирует с цитратом железа, образуя тёмно-коричневый или чёрный комплекс; реакция видна как зона чёрного осадка вокруг колоний. Желчь и азид натрия подавляют рост большинства сопутствующих бактерий. Триптон, протеозопептон и пептон HM B служат источниками углерода, азота, аминокислот, витаминов и других необходимых для роста питательных веществ.

Агар Bile Esculin Azide представляет собой модификацию агара Bile Esculin: концентрация желчи снижена, в состав добавлен азид натрия. Гидролиз эскулина также может использоваться для дифференциации некоторых представителей семейств Enterobacteriaceae, включая Klebsiella, Enterobacter и Serratia, от других родов этого семейства. Положительную реакцию на желчно-эскулиновой среде могут давать также вызывающие инфекции у человека виды Leuconostoc, Pediococcus и Lactococcus.

Положительная реакция сама по себе не подтверждает принадлежность к энтерококкам: для идентификации следует проводить дополнительные тесты, включая оценку устойчивости к соли.

Методика проведения анализа

Посев на чашки

Нанесите на поверхность чашки исследуемый инокулят в количестве 50–100 КОЕ одним из способов: штриховым посевом, инокуляцией или поверхностным распределением. Работайте асептически.

Исследование проб воды методом мембранной фильтрации

1. Отфильтруйте подозрительную пробу воды через мембранный фильтр.
2. Асептически поместите фильтр на среду Slanetz and Bartley (M612I).
3. После инкубации проверьте наличие колоний красного или бордового цвета.
4. Для подтверждения асептически перенесите мембранный фильтр на предварительно нагретую до 44 °C чашку с агаром Bile Esculin Azide.
5. Инкубируйте при 44 ± 0,5 °C в течение 2 ч.
6. Подсчитайте типичные колонии, вокруг которых среда приобрела коричнево-чёрную окраску; их учитывают как кишечные энтерококки.

Для прямого выделения энтерококков без мембранного фильтра инкубируйте посев при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Контроль качества

Внешний вид: стерильный агар Bile Esculin Azide в одноразовых чашках диаметром 90 мм.
Цвет среды: янтарный.
Количество среды: 25 мл в одноразовой чашке диаметром 90 мм.
pH: 6,90–7,30.
Тест на стерильность: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Типы проб и обращение с ними

Типы проб: пищевые продукты, молочная продукция, вода.

Для пищевых продуктов и молочной продукции применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб. Для воды следуйте установленным методам отбора и обработки проб и местным нормативным требованиям.

Ограничения применения

• Стрептококки группы viridans иногда дают слабоположительную реакцию.
• Требования отдельных микроорганизмов к росту различаются; на среде возможны вариабельные варианты роста.
• Каждая серия среды проверяется на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. Для выявления других микроорганизмов рекомендуется провести валидацию с учётом конкретных требований пользователя.
• Для подтверждения идентификации необходимы дополнительные биохимические тесты.

Условия хранения и срок годности

При получении храните при 20–30 °C. Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Для уменьшения образования конденсата на чашках рекомендуется хранение при 24–30 °C.

Безопасность и утилизация

Перед вскрытием упаковки прочитайте маркировку. При работе используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности при обращении с пробами и культурами. Дополнительные указания по безопасности приведены в паспортах безопасности.

После использования загрязнённые материалы стерилизуйте в автоклаве перед утилизацией. Использованные или непригодные препараты утилизируйте безопасным способом — автоклавированием и/или сжиганием. Соблюдайте лабораторные процедуры утилизации инфекционных материалов; материалы, контактировавшие с пробой, необходимо обеззаразить и утилизировать согласно действующим лабораторным методам.