Готовая селективно-дифференциальная питательная среда Агар Hektoen Enteric в чашке HiMedia MP467-10PT (10 чашек), производства HiMedia, поставляется в стерильных одноразовых чашках диаметром 90 мм. Среда предназначена для выделения и дифференциации Salmonella и Shigella из клинических образцов и пищевых продуктов; как селективную среду её применяют совместно с другими средами.

Назначение

Среда рекомендована для селективного и дифференциального выделения видов Salmonella и Shigella из патологического материала кишечного происхождения. Также применяется для посева образцов фекалий, мочи, пищевых продуктов и кормов для животных.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия

Среда разработана для повышения частоты выделения Shigella и Salmonella по сравнению с другими средами, применявшимися в клинических лабораториях. В её составе желчные соли в пониженной концентрации заменяют дезоксихолат натрия: это позволяет расти как Shigella, так и Salmonella. Повышенная концентрация пептона компенсирует ингибирующее действие желчных солей.

Повышенные концентрации углеводов и протеозного пептона также снижают ингибирующее действие желчных солей и индикаторов, обеспечивая хороший рост Salmonella и Shigella при подавлении нормальной кишечной микрофлоры. Лактоза, сахароза и салицин служат для дифференциации кишечных патогенов. Повышенная концентрация лактозы облегчает визуализацию патогенов и уменьшает влияние замедленной ферментации лактозы. Салицин ферментируют многие колиформные бактерии, в том числе не ферментирующие лактозу и сахарозу.

Сочетание цитрата аммонийного железа и тиосульфата натрия позволяет выявлять образование сероводорода (H₂S): на среде формируются колонии с чёрным центром. Индикаторная система из кислого фуксина и бромтимолового синего менее токсична, чем индикаторные системы других сред для энтеробактерий, что способствует восстановлению энтеропатогенов.

Для усиления селективности среды в отдельных методиках добавляют новобиоцин в концентрации 15 мг/л; он подавляет виды Citrobacter и Proteus. Среда также применяется для дифференциации патогенных кишечных микроорганизмов и улучшения роста Shigella.

Методика проведения анализа

1. Используйте свежие фекалии, суспендированные в растворе Рингера, либо непосредственно ректальный тампон.
2. Асептически внесите на чашку посевной материал в количестве 50–100 КОЕ: выполните штриховой посев, инокуляцию или поверхностное распределение материала.
3. Распределите посевной материал по поверхности, чтобы получить изолированные колонии.
4. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч. Дополнительная инкубация улучшает дифференциацию Salmonella и Shigella.
5. Подтвердите результат дополнительными исследованиями: виды Proteus могут быть похожи на Salmonella или Shigella.

После инкубации на большинстве чашек наблюдается участок сливного роста. Штриховой посев действует как метод последовательного разведения: количество микроорганизмов, попадающих на последующие участки штриха, уменьшается, поэтому на одном или нескольких участках должны появиться изолированные колонии микроорганизмов, содержащихся в образце. Ингибирующее действие среды способствует лучшему выделению изолированных колоний.

Подготовка и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами соблюдайте установленные правила их обращения. Для пищевых продуктов и молочных образцов соблюдайте установленные требования к отбору и обработке проб.

Загрязнённые материалы после использования перед утилизацией необходимо стерилизовать в автоклаве.

Ограничения применения

• Дополнительная инкубация улучшает дифференциацию Salmonella и Shigella. Виды Proteus могут быть похожи на Salmonella или Shigella, поэтому для подтверждения результата необходимы дополнительные исследования.
• Селективную среду необходимо использовать совместно с другими средами.
• Потребности микроорганизмов в условиях роста различаются; отдельные организмы могут демонстрировать на среде различные варианты роста.
• Каждая серия среды проверяется на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется подтвердить пригодность среды с учётом конкретных требований пользователя.
• Для предотвращения образования конденсата рекомендуется хранить чашки при 24–30 °C.

Контроль качества

Ожидаемые рабочие характеристики обеспечиваются при использовании среды в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

• Внешний вид: стерильный агар Hektoen Enteric в одноразовых чашках диаметром 90 мм; поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков.
• Цвет среды: зелёный.
• Объём среды: 25 мл в одноразовой чашке диаметром 90 мм.
• pH: 7,30–7,70.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* В скобках указаны соответствующие номера WDCM.

Ранее — Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения после получения: 20–30 °C.
• Температура хранения чашек для предотвращения конденсации: 24–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.