Готовая дифференциальная питательная среда Агар EMB в чашке HiMedia MP317-50PT (50 чашек) — стерильный агар в одноразовых чашках диаметром 90 мм. Среда предназначена для дифференциального выделения грамотрицательных кишечных палочек из клинических и неклинических образцов, при этом отдельные штаммы Salmonella и Shigella могут не расти на ней.

Назначение

Среду применяют для дифференциального выделения грамотрицательных кишечных палочек из клинических и неклинических образцов. В качестве образцов используют клинический материал, фекальные, пищевые пробы и пробы воды.

Состав

Состав среды, г/л:

Формула скорректирована и стандартизована для обеспечения заданных параметров работы среды.

Принцип действия

Эозин-метиленовый синий агар (EMB) первоначально разработан Холтом-Харрисом и Тигом, а затем модифицирован Левином. Среда сочетает компоненты обеих рецептур: пептон и фосфат, предложенные Левином, и два углевода, предложенные Холтом-Харрисом и Тигом.

Метиленовый синий и эозин Y в ограниченной степени подавляют рост грамположительных бактерий и служат дифференциальными индикаторами ферментации углеводов. Соотношение эозина и метиленового синего составляет приблизительно 6:1. Сахароза служит дополнительным источником углеводов для грамотрицательных палочек, обычно ферментирующих лактозу, но в отдельных случаях ферментирующих её медленно или не ферментирующих.

Колиформные бактерии при снижении pH поглощают комплекс красителей метиленового синего и эозина, поэтому образуют пурпурно-чёрные колонии. Комплекс красителей накапливается в колонии. Неферментирующие бактерии, вероятно, повышают pH окружающей среды за счёт окислительного дезаминирования белка; это приводит к растворению комплекса красителей и образованию бесцветных колоний.

Пептон служит источником углерода, азота и других необходимых для роста питательных веществ. Лактоза и сахароза являются источниками энергии и ферментируемыми углеводами. Эозин Y и метиленовый синий выполняют функцию дифференциальных индикаторов. Фосфат буферирует среду.

Методика посева и инкубации

1. Нанесите посевную дозу 50–100 КОЕ асептически на поверхность чашки: штриховым посевом, инокуляцией или распределением по поверхности.
2. Инкубируйте чашки, защищая их от света. Для получения изолированных колоний соблюдайте стандартные процедуры посева.
3. Одновременно с EMB агаром засевайте неселективную среду.
4. Для идентификации выделенных колоний проведите подтверждающие тесты.

Типы образцов и обращение с ними

• Пищевые пробы: сбор и обработку проб выполняйте с использованием соответствующих методик и рекомендаций.
• Пробы воды: сбор и обработку выполняйте с использованием соответствующих методик, рекомендаций и местных нормативов.
• Клинические образцы: обращайтесь с ними в соответствии с установленными рекомендациями.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид и параметры среды

• Внешний вид: стерильный EMB агар в одноразовых чашках диаметром 90 мм; поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков.
• Цвет среды: красновато-пурпурный с зеленоватым отливом.
• Объём среды: 25 мл в одноразовой чашке диаметром 90 мм.
• pH: 7,00–7,40.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

• Звёздочкой отмечены соответствующие номера WDCM.

Ранее вид назывался Enterobacter aerogenes.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы имеют неодинаковые требования к росту и могут демонстрировать различные варианты роста на среде.
• Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При использовании для других микроорганизмов рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований пользователя.
• Для идентификации выделенных колоний необходимо провести подтверждающие тесты.
• Некоторые штаммы Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового синего.
• Для уменьшения конденсации рекомендуется хранить чашки при 24–30 °C.

Условия хранения и срок годности

При получении хранить при 20–30 °C. Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке. Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в пределах указанного срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Предупреждения и меры предосторожности

Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального применения. Перед вскрытием упаковки прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, одежду, очки и средства защиты лица. При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики. При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности. Дополнительные указания по безопасности приведены в паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, подлежат обеззараживанию и утилизации в соответствии с действующими лабораторными методиками.