Агар OFBL в чашке (Oxidation Fermentation Polymyxin Bacitracin лактоза агар в чашке) HiMedia MP1811-50PT (50 чашек)

Готовая селективная питательная среда Агар OFBL в чашке (Oxidation Fermentation Polymyxin Bacitracin лактоза агар в чашке) HiMedia MP1811-50PT (50 чашек) предназначена для выделения Burkholderia cepacia. Среда применяется для клинических и неклинических образцов; селективность обеспечивают полимиксин B и бацитрацин.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения Burkholderia cepacia из клинических и неклинических образцов. Подходящие клинические образцы: мокрота, бронхиальные смывы и мазки из глотки.

Состав

Состав среды:

Рецептура скорректирована и стандартизована для достижения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия

Burkholderia cepacia — условно-патогенный микроорганизм, связанный с внутрибольничными инфекциями. Благодаря способности длительно сохраняться в неблагоприятных условиях бактерия может обнаруживаться на оборудовании, в лекарственных препаратах, ополаскивателях для полости рта и дезинфицирующих средствах. Вызываемые ею внутрибольничные инфекции включают бактериемию, инфекции мочевыводящих путей и респираторные инфекции.

Выявление Burkholderia cepacia особенно важно у пациентов с муковисцидозом, предрасположенных к инфекции: при отсутствии лечения состояние таких пациентов может быстро ухудшаться из-за снижения функции лёгких, частой бактериемии и дыхательной недостаточности. Микроорганизм также описан как причина бактериемии, пневмонии и смерти среди пациентов с хронической гранулематозной болезнью.

Среда OFPBL представляет собой модификацию базовой среды OF (окисление—ферментация), разработанной Welch и соавторами в 1987 году. В опубликованном исследовании агар OFPBL обеспечивал более эффективное выделение Burkholderia cepacia по сравнению с другими селективными средами, включая агар МакКонки, агар XLD и различные кровяные агары.

Триптон служит источником азотсодержащих соединений, а лактоза — источником углеводов, который Burkholderia cepacia легко утилизирует. Ферментация лактозы приводит к образованию кислых конечных продуктов. Бромтимоловый синий выявляет изменение pH: при достаточном накоплении кислоты среда меняет цвет с зелёного на жёлтый, окрашивая колонии в жёлтый цвет. Дикалия гидрофосфат буферирует среду, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Селективность обеспечивают антибиотики полимиксин B и бацитрацин. Их сочетание подавляет сопутствующую бактериальную флору, присутствующую в респираторных выделениях и мокроте, в том числе грамположительные микроорганизмы и Neisseria.

Методика посева и инкубации

1. Асептически нанесите на поверхность чашки тестовый инокулят 50–100 КОЕ: штрихом, инокуляцией либо распределением по поверхности.
2. Для прямого или разведённого инокулята образца можно использовать посев штрихом в четыре сектора, чтобы получить хорошо изолированные колонии.
3. Если образец собран тампоном, прокатайте тампон по небольшому участку у края чашки, затем выполните дальнейший посев стерильной петлёй для выделения изолированных колоний.
4. Инкубируйте при 30–35 °C. Осматривайте чашки ежедневно в течение периода до пяти дней; перед утилизацией оцените результат. Обычно колонии появляются через 48–72 ч.

Интерпретация результатов и ограничения

Колонии Burkholderia cepacia обычно жёлтые, с жёлтым ореолом. Большинство штаммов растёт в течение 48 ч, однако некоторым штаммам для развития окраски может потребоваться до пяти дней. Рост других микроорганизмов на этой среде обычно подавляется.

На среде также могут расти сходные бактерии, например Pseudomonas aeruginosa, образующие жёлтые колонии. Burkholderia gladioli, обнаруживаемая в образцах дыхательных путей пациентов с муковисцидозом, также способна расти на агаре OFPBL и может быть похожа на B. cepacia. Для дифференциации и полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и/или серологические исследования изолированных колоний чистой культуры.

Любой рост считают положительным результатом и подтверждают дополнительными исследованиями. Пожелтение среды указывает на ферментацию углеводов; редкие атипичные штаммы Burkholderia cepacia могут не вызывать этой реакции.

Контроль качества

Внешний вид и физико-химические показатели

• Внешний вид: стерильный агар OFPBL в одноразовых чашках диаметром 90 мм; поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков.
• Цвет среды: зелёный.
• Объём среды: 25 мл в чашке диаметром 90 мм.
• pH: 6,60–7,00.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 48–72 ч; наблюдение продолжают до пяти дней.

Звёздочкой отмечены соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые рабочие характеристики обеспечиваются при использовании по инструкции на этикетке и в пределах срока годности при хранении в рекомендованных условиях.

Сбор и обработка образцов

При работе с клиническими образцами соблюдайте установленные правила сбора и обработки.