Агар OFBL в чашке (Oxidation Fermentation Polymyxin Bacitracin лактоза агар в чашке) HiMedia MP1811-20PT (20 чашек)

Готовая селективная питательная среда в чашках — агар OFBL (окисление-ферментация, полимиксин, бацитрацин, лактоза) HiMedia MP1811-20PT (20 чашек) — предназначена для выделения Burkholderia cepacia из клинических и неклинических образцов. Среда применяется для микробиологического контроля, но сходные бактерии, включая Pseudomonas aeruginosa, также могут образовывать жёлтые колонии и требуют дополнительной идентификации.

Назначение

Среда с полимиксином и бацитрацином предназначена для селективного выделения Burkholderia cepacia из клинических и неклинических образцов. Рекомендуемые образцы: мокрота, бронхиальные смывы и мазки из глотки.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизована для соответствия параметрам эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар OFPBL представляет собой модифицированную основную среду OF (окисление-ферментация), разработанную в 1987 году группой исследователей Welch и соавторами. В сравнении с другими селективными средами, включая агар МакКонки, агар XLD и различные кровяные агары, применение агара OFPBL обеспечивало лучшее восстановление и выделение Burkholderia cepacia.

Триптон обеспечивает среду азотсодержащими соединениями, а лактоза служит источником углеводов и легко утилизируется Burkholderia cepacia. При ферментации лактозы образуются кислые конечные продукты; их выявляют по изменению цвета индикатора pH — бромтимолового синего. При достаточном образовании кислоты среда меняет цвет с зелёного на жёлтый, придавая колониям жёлтую окраску. Гидрофосфат дикалия обеспечивает буферные свойства среды, хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Селективность обеспечивают антибиотики полимиксин B и бацитрацин, подавляющие сопутствующую бактериальную флору респираторных выделений и мокроты, в том числе грамположительные микроорганизмы и Neisseria.

Burkholderia cepacia — условно-патогенный микроорганизм, связанный с внутрибольничными инфекциями. Благодаря способности длительно выживать в неблагоприятных условиях он может обнаруживаться на оборудовании, в лекарственных препаратах, средствах для полоскания рта и дезинфицирующих средствах. Вызываемые им внутрибольничные инфекции включают бактериемию, инфекции мочевыводящих путей и респираторные инфекции. Особое значение выявление микроорганизма имеет у пациентов с муковисцидозом: у них повышена предрасположенность к инфекции, а при отсутствии лечения возможно быстрое снижение функции лёгких, частая бактериемия и смерть вследствие дыхательной недостаточности. Burkholderia cepacia также является одной из основных причин бактериемии, пневмонии и смерти у пациентов с хронической гранулематозной болезнью. Поэтому важно быстро и точно выделять и идентифицировать микроорганизм. Для выделения Burkholderia cepacia из клинических образцов рекомендуются агаровые чашки с агаром Burkholderia cepacia (MP1640) и агаром OFBL (MP1811).

Колонии Burkholderia cepacia обычно жёлтые, с жёлтыми ореолами. Большинство штаммов растёт в течение 48 ч, однако некоторым штаммам для развития окраски может потребоваться до 5 дней. Рост большинства других микроорганизмов на этой среде подавляется. Похожие бактерии, например Pseudomonas aeruginosa, также могут расти в виде жёлтых колоний; для их дифференциации от Burkholderia cepacia необходимо дополнительное тестирование. Burkholderia gladioli, обнаруживаемая в образцах из дыхательных путей пациентов с муковисцидозом, также растёт на агаре OFPBL и может быть похожа на B. cepacia. Любой рост рассматривают как положительный результат; для полной идентификации выделенных из чистой культуры колоний проводят дополнительные биохимические и/или серологические тесты. Пожелтение среды указывает на ферментацию углеводов; некоторые редкие атипичные штаммы Burkholderia cepacia могут не вызывать этой реакции.

Методика проведения анализа

1. Асептически нанесите на чашку исследуемый инокулят с посевной дозой 50–100 КОЕ: выполните штриховой посев, инокуляцию или поверхностное распределение.
2. Для получения хорошо изолированных колоний используйте прямой или разведённый инокулят и выполните посев штриховым методом в четыре сектора.
3. Если образец собран на тампон, прокатите тампон по небольшому участку у края чашки, затем выполните дальнейший посев для выделения колоний стерильной петлёй.
4. Инкубируйте чашки при 30–35 °C и осматривайте ежедневно, максимум в течение 5 дней; затем утилизируйте. Обычно колонии появляются через 48–72 ч.

Контроль качества

Внешний вид: стерильный агар O.F.P.B.L. в одноразовых чашках диаметром 90 мм; поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков.

Цвет среды: зелёный.

Объём среды: 25 мл в одноразовой чашке диаметром 90 мм.

pH: 6,60–7,00.

Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 48–72 ч; наблюдение продолжают максимум до 5 дней.

* Соответствующие номера WDCM.

Эффективность среды ожидается при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Ограничения метода

• Pseudomonas aeruginosa и другие сходные бактерии также могут образовывать жёлтые колонии; для дифференциации от Burkholderia cepacia необходимо дополнительное тестирование.
• Для полной идентификации проводят дополнительные биохимические и серологические тесты.

Обращение с образцами и безопасность

При работе с клиническими образцами соблюдайте установленные правила их сбора и обращения, а также стандартные меры предосторожности. При работе с образцами и культурами соблюдайте правила микробиологической лаборатории и используйте защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица. Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку; при необходимости обратитесь к паспорту безопасности.

Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального применения.

После использования загрязнённые материалы стерилизуйте в автоклаве до утилизации. Использованные или