Готовые чашки с агаром «Агар Мюллера-Хинтона чашка, с 5 % кровь барана HiMedia MP1806-50PT (50 чашек)» — стерильная среда с 5 % крови барана. Среда предназначена для определения чувствительности видов Streptococcus к антимикробным препаратам методом диффузии в агар и применяется для тестирования чистых культур.

Назначение

Среда предназначена для определения чувствительности видов Streptococcus к антимикробным препаратам. Метод основан на диффузии антимикробного вещества из бумажного диска в агаровый гель; диаметры зон подавления роста сопоставляют с критериями CLSI и EUCAST.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных характеристик.

Эквивалентно настою из говядины.

Эквивалентно кислотному гидролизату казеина.

Принцип действия и методика проведения анализа

Первоначально рецептура агара Мюллера—Хинтона была разработана как простая прозрачная агаровая среда для культивирования патогенных видов Neisseria. Позднее для их культивирования были разработаны другие среды, однако агар Мюллера—Хинтона получил широкое применение при определении устойчивости гонококков и других микроорганизмов к сульфонамидам. В настоящее время среду используют для тестирования чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам.

Агар Мюллера—Хинтона рекомендован для диффузии антимикробных веществ из бумажных дисков через агаровый гель в соответствии с методами, утверждёнными CLSI и EUCAST. Kirby—Bauer и соавторы рекомендовали эту среду для тестирования чувствительности к антибиотикам с использованием одного диска с высокой концентрацией препарата. Комитет ВОЗ по стандартизации тестирования чувствительности принял агар Мюллера—Хинтона для определения чувствительности микроорганизмов благодаря воспроизводимости результатов.

Настой HM и ациказа обеспечивают среду азотсодержащими соединениями, углеродом, серой и другими необходимыми питательными веществами. Крахмал действует как защитный коллоид против токсичных веществ, присутствующих в среде; при гидролизе крахмала образуется декстроза, служащая источником энергии. Компоненты подобраны с низким содержанием тимина и тимидина, что оценивают по значениям минимальной ингибирующей концентрации (МИК) для Enterococcus faecalis при использовании сульфаметоксазола и триметоприма (SXT).

Метод Kirby—Bauer основан на диффузии антимикробных веществ, нанесённых на бумажные диски, в агар. Используют диски с одной концентрацией антимикробного препарата; диаметры зон подавления роста сопоставляют со значениями МИК.

1. Приготовьте стандартизованную суспензию микроорганизма. Нанесите инокулят на всю поверхность среды тампоном либо внесите его штриховым или поверхностным способом. Для нанесения на чашку асептически используют 50–100 КОЕ.
2. Разместите на поверхности среды бумажные диски с заданным количеством антимикробных препаратов.
3. Инкубируйте чашку. Конкретные условия инкубации для проведения теста в описании не указаны.
4. Измерьте диаметры зон подавления роста вокруг дисков.
5. Определите чувствительность, сопоставив диаметры зон с критериями CLSI и EUCAST.

На результаты диско-диффузионного теста влияют глубина слоя агара, активность дисков, концентрация инокулята, pH среды и продукция тестируемыми микроорганизмами бета-лактамазы.

Типы образцов

Для тестирования используют выделенные из клинических образцов микроорганизмы, в том числе из мочи, кала и гноя. Для анализа рекомендуется применять только чистые культуры. Клинические образцы, взятые тампоном, допускается использовать непосредственно, однако результат необходимо подтвердить повторным тестированием чистой культуры.

Технические характеристики

• Тип изделия: готовая стерильная чашка с агаром Мюллера—Хинтона и 5 % крови барана
• Количество в упаковке: 50 чашек
• Диаметр одноразовой чашки: 90 мм
• Объём среды в чашке: 25 мл
• Поверхность среды: выпуклая
• Цвет среды: красный
• pH: 7,10–7,50
• Контроль стерильности: соответствует критериям выпуска
• Внешний вид: без чёрных частиц, трещин и пузырьков

Контроль культуральных характеристик

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч; среда содержит 5 % стерильной крови барана.

Ограничения применения

• Среда предназначена для тестирования чувствительности только чистых культур.
• Плотность инокулята влияет на размер зоны подавления роста: чрезмерно плотный инокулят может привести к уменьшению зон, а недостаточный — к их увеличению.
• Активность дисков с антимикробными препаратами зависит от правильного хранения дисков.
• В отдельных случаях результаты определения чувствительности in vitro могут не совпадать с результатами in vivo.
• Каждая серия среды проверяется на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA).

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения после получения: 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Меры предосторожности и утилизация

Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального применения. Перед вскрытием упаковки прочитайте маркировку. При работе используйте защитные перчатки, одежду, очки и средства защиты лица. Соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики и установленные меры предосторожности при работе с клиническими образцами; дополнительные сведения по безопасности приведены в паспортах безопасности.

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием. Загрязнённые материалы перед утилизацией стерилизуйте в автоклаве. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами и инфекционными веществами, обеззараживайте и утилизируйте в соответствии с действующими лабораторными процедурами.