Агар Bordet Gengou в чашке, с 25 % кровь барана HiMedia MP175SB-10PT (10 чашек)

Готовые чашки с агаром Bordet Gengou, с 25 % кровью барана HiMedia MP175SB-10PT (10 чашек) — питательная среда для выделения бактерий рода Bordetella. Применяется для обнаружения и изоляции Bordetella pertussis и Bordetella parapertussis из клинических образцов, включая метод «кашлевой чашки»; инкубацию проводят во влажной камере до 7 дней.

Назначение

Среда предназначена для обнаружения и изоляции Bordetella pertussis и Bordetella parapertussis. Также применяется при коклюше для выделения возбудителя методом «кашлевой чашки».

Состав

Формула на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных характеристик среды.

Принцип действия

Среду Борде—Жангу первоначально разработали для культивирования бактерий рода Bordetella. Bordetella pertussis — возбудитель коклюша; при использовании метода «кашлевой чашки» бактерию можно выделить из смывов с глотки, носоглоточного секрета и мазков из передних отделов носа.

В модифицированной среде 50 % человеческой или кроличьей крови заменили на 15 % крови барана, чтобы обогатить среду и выявлять B. pertussis по гемолитической реакции. Обогащение базовой среды 25 % человеческой крови способствует обнаружению бактерий рода Mycobacterium при внесении небольших объёмов мокроты и проведении тестирования чувствительности к стрептомицину.

Картофельный настой и пептон служат источниками углерода, азота и аминокислот. Глицерин и кровь обеспечивают дополнительное питание, а хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Питательная среда поддерживает обильный рост бактерий рода Bordetella; её также можно использовать для массового культивирования B. pertussis при производстве вакцин и для поддержания запасных культур.

Методика проведения анализа

1. Асептически нанесите посевной материал на поверхность чашки штриховым методом, инокуляцией или поверхностным распределением. Посевная доза: 50–100 КОЕ.
2. Инкубируйте чашки во влажной камере при относительной влажности 60 % и температуре 35–37 °C в течение 7 дней. В описании принципа применения также указан режим инкубации при 37 °C продолжительностью до 7 дней.
3. Осматривайте чашки ежедневно, при необходимости используя стереомикроскоп с косым освещением для обнаружения B. pertussis. Колонии могут быть не видны без микроскопа в течение 2–4 дней.
4. Примерно через 40 ч колонии B. pertussis становятся гладкими, выпуклыми и блестящими; вокруг них может образовываться зона гемолиза. Некоторые штаммы Bordetella не проявляют гемолиза.
5. Если распространяющиеся колонии плесени маскируют колонии B. pertussis, удалите содержащий плесень участок агара стерильным скальпелем или иглой.
6. По истечении 7 дней инкубации чашки следует считать отрицательными и утилизировать.

Для выделения B. pertussis из образцов применяйте стандартные процедуры. Для подтверждения результата необходимы серодиагностика и биохимические тесты. Некоторые виды Haemophilus растут на средах для выделения Bordetella и дают перекрёстную реакцию с антисыворотками к B. pertussis; рекомендуется проверить зависимость предполагаемого изолята от факторов X и V.

Типы образцов

Клинические образцы: смывы с глотки, носоглоточный секрет и мазки из передних отделов носа. Для лиц с подозрением на заболевание собирают мазки или аспираты из носоглотки.

Сбор, транспортировка и обработка образцов

При работе с клиническими образцами соблюдайте соответствующие установленные правила сбора и обработки. При сборе образцов используйте процедурную маску, поскольку B. pertussis и B. parapertussis высококонтагиозны. Транспортируйте мазок в лабораторию для последующей обработки.

Материалы, загрязнённые после использования, перед утилизацией необходимо стерилизовать в автоклаве. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, следует обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными процедурами.

Контроль качества

Внешний вид: стерильная чашка с агаром Bordet Gengou и 25 % кровью барана в одноразовой чашке диаметром 90 мм. Поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков.

Цвет среды: непрозрачная, вишнёво-красная.

Объём среды: 25 мл в одноразовой чашке диаметром 90 мм.

pH среды: 6,50–6,90.

Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 3–4 дней.

Звёздочка обозначает соответствующий номер WDCM.

Ограничения применения

• Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к росту и могут демонстрировать на среде разные варианты роста.
• Каждую серию среды проверяют на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для других микроорганизмов рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований пользователя.
• Некоторые виды Haemophilus растут на средах для выделения Bordetella и дают перекрёстную реакцию