Агар HiCrome® E. coli в чашке HiMedia MP1295I-20PT (20 чашек)

Готовая питательная среда в чашке «Агар HiCrome® E. coli в чашке HiMedia MP1295I-20PT (20 чашек)» — хромогенная среда для выявления Escherichia coli. Предназначена для обнаружения и подсчёта E. coli в пищевых продуктах; для выявления предусмотрена оценка окраски колоний, а ограничения метода включают возможность ложноотрицательного результата для отдельных штаммов.

Назначение

Среда предназначена для обнаружения и подсчёта Escherichia coli в пищевых продуктах без дополнительного подтверждения с помощью мембранной фильтрации или индольного реактива. Также может применяться для выделения E. coli из образцов. Состав и рабочие характеристики соответствуют требованиям ISO 16649-2:1999.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия

Среда на основе триптон-желчного агара предназначена для выявления Escherichia coli в пищевых продуктах. Большинство штаммов E. coli можно отличить от других колиформных бактерий по наличию фермента β-глюкуронидазы, высокоспецифичного для E. coli.

Хромогенный субстрат X-глюкуронид выявляет активность β-глюкуронидазы: клетки E. coli поглощают X-глюкуронид, после чего внутриклеточный фермент расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом. Высвобождающийся хромофор придаёт колониям E. coli сине-зелёную окраску.

Триптон обеспечивает микроорганизмы углеродом, азотсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми для роста питательными веществами. Смесь желчных солей подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Методика проведения анализа

1. Перед использованием подсушите поверхность среды в чашке.
2. Для пищевых образцов выполните разведение 1:5 или 1:10 стерильной 0,1%-ной (м/об) пептонной водой M028.
3. Гомогенизируйте образец в блендере или лопаточном гомогенизаторе.
4. Перенесите 0,5 мл или 1,0 мл гомогенизированного образца на поверхность чашки и распределите стерильным стеклянным шпателем.
5. Инкубируйте чашки при 30 °C в течение 4 ч, затем при 44 °C в течение 18 ч.

Для внесения тестовой посевной дозы 50–100 КОЕ допускается асептически нанести инокулят штриховым методом, уколом или поверхностным распределением.

Тип образца и обращение с ним

Тип образца: пищевые продукты.

Сбор и обработку пищевых образцов выполняйте подходящими методами в соответствии с применимыми руководствами. После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать в автоклаве.

Контроль качества

Внешний вид: стерильная чашка с агаром HiCrome® E. coli диаметром 90 мм; поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков.

Цвет среды: светло-жёлтый.

Объём среды: 25 мл в одноразовой чашке диаметром 90 мм.

pH: 7,00–7,40.

Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44 °C в течение 18–24 ч; в сертификате анализа указана температура 35–37 °C.

• Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы могут быть β-глюкуронидаза-отрицательными.
2. Некоторые виды Salmonella являются β-глюкуронидаза-положительными.
3. Потребности микроорганизмов в условиях роста различаются; на среде могут наблюдаться вариабельные картины роста.
4. Каждая серия среды проверяется на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. Для применения с другими микроорганизмами пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований.
5. Для подтверждения результата необходимы дополнительные биохимические и серологические тесты.

Условия хранения и срок годности

Температура хранения после получения: 2–8 °C. Используйте среду до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. Рабочие характеристики сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности и соблюдении рекомендованных условий хранения.

Меры предосторожности и утилизация

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности при обращении с образцами и культурами. При необходимости руководствуйтесь паспортами безопасности.

Использованные или непригодные препараты утилизируйте безопасным способом — автоклавированием и/или сжиганием. Соблюдайте установленные лабораторные процедуры утилизации инфекционных материалов. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методами.