Готовые чашки с агаром «Агар M-Endo в чашке HiMedia MP1106-20PT (20 чашек)» содержат 25 мл среды на чашку. Среда предназначена для количественного определения колиформных бактерий в воде методом двухэтапной мембранной фильтрации; при чрезмерной посевной нагрузке металлический блеск колоний может подавляться.

Назначение и область применения

Среду используют для количественного определения колиформных бактерий в пробах воды методом двухэтапной мембранной фильтрации. Рекомендуется для анализа питьевой воды и бутилированной воды; применение для этих целей рекомендовано APHA.

Тип образца: вода.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизована для обеспечения требуемых характеристик среды.

Принцип метода

Бактерии извлекают из жидкости фильтрованием через мембрану с порами малого размера, задерживающими микроорганизмы. Фильтрация позволяет быстро пропускать под давлением сравнительно большие объёмы воды, удерживая присутствующие в пробе бактерии. Питательные вещества задерживаются на поверхности мембраны; при контакте мембраны с подходящей жидкой питательной средой вещества диффундируют вверх через поры и обеспечивают рост микроорганизмов в виде поверхностных колоний, которые можно подсчитать.

Среда Endo первоначально была разработана для дифференциации бактерий, ферментирующих лактозу, и бактерий, которые её не ферментируют. В исходной рецептуре сульфит натрия и основной фуксин использовались вместо желчных солей для подавления грамположительных бактерий. Агар M-Endo LES является модификацией исходной среды; рецептура разработана по McCarthy и соавторам из Lawrence Experimental Station (LES) для определения колиформных бактерий в воде двухэтапным методом мембранной фильтрации. В качестве первичной обогатительной среды используют бульон с лаурилсульфатом (M080).

Триптон, триптоза, пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают необходимые питательные вещества, в частности азотсодержащие соединения. Лактоза служит сбраживаемым углеводом. Сульфит натрия, дезоксихолат натрия и основной фуксин подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Фосфаты выполняют функцию буфера. Колиформные бактерии ферментируют лактозу; образующийся ацетальдегид реагирует с сульфитом натрия и основным фуксином, в результате чего формируются красные колонии и окрашивается среда. Бактерии, не ферментирующие лактозу, образуют бесцветные колонии.

Методика проведения анализа

1. Асептически нанесите на чашку исследуемый инокулят в количестве 50–100 КОЕ одним из способов: штриховым посевом, инокуляцией или поверхностным распределением.
2. Не подвергайте чашки с агаром воздействию света: это может привести к фотоокислению и снижению продуктивности среды.
3. Для определения колиформных бактерий в воде используйте двухэтапную мембранную фильтрацию с бульоном с лаурилсульфатом (M080) в качестве первичной обогатительной среды.
4. Инкубируйте чашки при 35–37 °C в течение 24 ч. Предполагаемые колиформные бактерии образуют красные колонии с металлическим блеском.

Контроль качества

Внешний вид: стерильный агар M-Endo LES в одноразовой чашке диаметром 90 мм.
Объём среды: 25 мл на чашку.
Цвет среды: тёмно-розовый или фиолетовый.
Реакция среды: pH 7,00–7,40.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 20–24 ч.

Звёздочкой отмечены соответствующие номера WDCM.

Ранее — Enterobacter aerogenes.

Ограничения и меры предосторожности

• При чрезмерно высокой посевной