Готовая селективно-дифференциальная питательная среда Deoxycholate цитрат агар в чашке HiMedia MP065-10PT (10 чашек) — стерильный агар в одноразовых чашках диаметром 90 мм. Среда предназначена для выделения кишечных патогенов, прежде всего Salmonella и Shigella; при выделении Shigella рекомендуется использовать менее ингибирующую среду.

Назначение

Среду применяют для выделения и максимального восстановления кишечных патогенов групп Salmonella и Shigella из пищевых продуктов. Типы образцов: клинический материал и пищевые продукты.

Для рутинного исследования образцов кала и мочи рекомендуется использовать эту среду совместно с другими средами, например агаром МакКонки (M082) и сульфит-висмутовым агаром (M027).

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизована для достижения параметров эффективности.

HI solids эквивалентны сухим веществам сердечного экстракта.

Принцип действия

Среда приготовлена по модифицированной формуле Лейфсона. По сравнению с дезоксихолатным агаром она обладает умеренно более высокой селективностью в отношении кишечных патогенов благодаря повышенным концентрациям цитрата и дезоксихолатных солей.

Дезоксихолат натрия при pH 7,3–7,5 подавляет грамположительные бактерии. Цитратные соли в концентрации, предусмотренной рецептурой, также ингибируют грамположительные бактерии и большинство других представителей нормальной кишечной микрофлоры. Сухие вещества HI служат источником углерода и азота; этот компонент обеспечивает более выраженное подавление колиформных бактерий, чем экстракт или простой пептон. Протеозопептон обеспечивает среду углеродом, азотом, витаминами и минеральными веществами. Дезоксихолат натрия, цитрат натрия и цитрат аммония железа ингибируют или существенно подавляют колиформные и грамположительные бактерии.

Лактоза используется для дифференциации кишечных бацилл: ферментирующие лактозу бактерии образуют красные колонии, а неферментирующие — бесцветные. При наличии колиформных бактерий на среде формируются розовые колонии. Расщепление лактозы подкисляет среду вокруг колоний, а индикатор pH нейтральный красный приобретает красную окраску. Обычно вокруг таких колоний также образуется мутная зона осаждённой дезоксихолевой кислоты. В кислой среде дезоксихолат натрия связывается с нейтральным красным; краситель выпадает из раствора с последующим осаждением дезоксихолата.

Восстановление цитрата аммония железа до сульфида железа проявляется образованием чёрного сульфида железа. Виды Salmonella и Shigella не ферментируют лактозу; некоторые виды Salmonella могут образовывать H₂S, формируя бесцветные колонии с чёрным центром или без него.

Сочетание цитрата и железа оказывает выраженное гидролизующее действие на агар при нагревании, из-за чего агар становится мягким и неэластичным. После автоклавирования агар становится мягким, и штриховой посев на нём практически невозможен.

При повышении концентрации дезоксихолата натрия до 0,1 % и выше подавляется Salmonella Gallinarum. Поверхностные колонии бактерий, не ферментирующих лактозу, могут поглощать небольшое количество красителя из среды и приобретать розоватый оттенок; такие микроорганизмы можно ошибочно принять за колиформные бактерии.

Методика посева

1. Соблюдая асептику, нанесите на чашку исследуемый инокулят с посевной дозой 50–100 КОЕ одним из способов: штриховым посевом, внесением инокулята или поверхностным распределением.

Технические характеристики

• Форма выпуска: стерильная среда в одноразовой чашке диаметром 90 мм
• Объём среды: 25 мл на чашку
• Цвет среды: красновато-оранжевый
• Внешний вид: гладкая поверхность, без чёрных частиц, трещин и пузырьков
• Реакция среды: 7,30–7,70
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска

Культуральные характеристики

* Соответствующие номера WDCM.

Сбор и обращение с образцами

При работе с клиническими образцами соблюдайте принятые правила обращения с материалом. Сбор и обработку пищевых образцов выполняйте в соответствии с применимыми рекомендациями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать на среде неодинаковые варианты роста.
• Каждая серия среды проверяется на организмы, указанные в сертификате анализа. При необходимости применения для микроорганизмов, не указанных в сертификате, рекомендуется предварительно подтвердить пригодность среды для конкретной задачи.
• Для подтверждения вида требуется дальнейшая биохимическая идентификация.
• Для выделения Shigella рекомендуется применять менее ингибирующую среду.

Условия хранения и срок годности

При получении хранить при температуре 20–30 °C. Для уменьшения конденсации на чашках рекомендуется хранение при 24–30 °C. Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке и в пределах срока годности при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Меры предосторожности и утилизация

Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального применения. Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, одежду, очки и средства защиты лица. Соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности при работе