Агар Бэрд-Паркера чашка HiMedia MP043-20PT (20 чашек)

Готовая питательная среда в чашках Агар Бэрд-Паркера чашка HiMedia MP043-20PT (20 чашек) предназначена для выделения и количественного учёта коагулазоположительных стафилококков. Среда применяется для анализа пищевых, молочных и клинических образцов; для подтверждения результатов требуются дополнительные биохимические тесты.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и количественного учёта коагулазоположительных стафилококков из пищевых и клинических образцов. Типы клинических образцов: гной, материал из ран. Также среда предназначена для исследования пищевых и молочных продуктов.

Состав

Формула среды скорректирована и стандартизирована для достижения заданных рабочих характеристик. Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип дифференциации

Агар Бэрд-Паркера разработан на основе теллурит-глициновой рецептуры Zebovitz и применяется для выделения и количественного учёта стафилококков в пищевых и других материалах. Среда позволяет дифференцировать коагулазоположительные штаммы.

Обнаружена высокая корреляция между результатом коагулазного теста и появлением прозрачной зоны липолиза на среде. Зона образуется вследствие действия стафилококковой лецитиназы, расщепляющей яичный желток. Почти 100 % коагулазоположительных стафилококков способны восстанавливать теллурит, в результате чего образуются чёрные колонии; другие стафилококки не всегда обладают этой способностью. По сравнению с другими средами агар Бэрд-Паркера оказывает меньшее ингибирующее действие на Staphylococcus aureus и одновременно обеспечивает более высокую селективность.

Триптон, пептон HM B и дрожжевой экстракт служат источниками азота, углерода, серы и витаминов. Пируват натрия защищает повреждённые клетки и способствует их восстановлению, а также стимулирует рост Staphylococcus aureus, не снижая селективности среды. Хлорид лития и теллурит калия подавляют большинство сопутствующей микрофлоры, за исключением Staphylococcus aureus. Добавка теллурита токсична для образующих зоны просветления яичного желтка микроорганизмов, отличных от S. aureus, и придаёт колониям чёрную окраску. Глицин и пируват усиливают рост стафилококков.

После добавления яичного желтка среда становится жёлтой и непрозрачной. Яичный желток обогащает среду и помогает идентификации микроорганизмов по активности лецитиназы. Для коагулазоположительных стафилококков диагностическими признаками служат прозрачная зона и серо-чёрные колонии. При дальнейшем инкубировании вокруг колоний появляется непрозрачная зона, которая может быть связана с липолитической активностью.

Методика проведения анализа

1. Асептически нанесите на поверхность чашки исследуемый материал: штриховым посевом, посевом инокулята или поверхностным распределением. Для посева используют 50–100 КОЕ.
2. При исследовании материала рекомендуемый объём составляет 0,1 мл на чашку диаметром 90–100 мм.
3. Инкубируйте при 37 °C. Первичный учёт проведите через 24–26 ч.
4. Колонии Staphylococcus aureus имеют чёрную блестящую окраску, тонкий белый край и окружены прозрачной зоной.
5. Продолжите инкубацию при 37 °C ещё 24 ч. Проведите коагулазный тест колоний с указанными выше характеристиками, развившимися в течение дополнительной инкубации.
6. Для количественного результата выберите 20–200 колоний. Подсчитайте колонии, сходные с Staphylococcus aureus, и проверьте их коагулазную реакцию.
7. Результат для пищевого продукта укажите как количество Staphylococcus aureus на грамм продукта.

Чашки следует использовать в день приготовления или в течение 48 ч, чтобы избежать потери чёткости зон осаждения. Колонии некоторых контаминирующих микроорганизмов могут разрушать ореол коагулазной реакции.

Обращение с образцами и биологическая безопасность

Для клинических образцов соблюдайте установленные правила обращения с материалом. Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методики отбора и подготовки проб. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального применения. Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку. При работе используйте защитные перчатки, одежду, очки и средства защиты лица. Соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами, а также стандартные меры предосторожности для клинических образцов. Дополнительные указания по безопасности приведены в паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид: стерильные чашки с агаром Бэрд-Паркера в одноразовых чашках диаметром 90 мм; поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков.

Цвет среды: жёлтая непрозрачная среда.

pH: 6,80–7,20.

Количество среды: 25 мл в одноразовой чашке диаметром 90 мм.

Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Восстановление | Цвет колоний | Лецитиназа