XLD-агар чашка, модифицированный HiMedia MP031I-20PT (20 чашек)

Готовая питательная среда в чашке XLD-агар чашка, модифицированный HiMedia MP031I-20PT (20 чашек) — стерильная среда объёмом 25 мл в одноразовой чашке диаметром 90 мм. Предназначена для селективного выделения и количественного учёта Salmonella Typhi и других видов Salmonella из пищевых продуктов, молочных продуктов и воды; среда также дифференцирует микроорганизмы по ферментации углеводов и образованию H₂S.

Назначение и соответствие методам

Среда рекомендована для селективного выделения и количественного учёта Salmonella Typhi и других видов Salmonella. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям ISO 6579-1:2017/Amd:2020, ISO 19250:2010(E) и APHA. Для модифицированной среды XLD Agar, Modified используются обозначения M0311 и MP0311.

Состав

XLD-агар по спецификации ISO

Состав на 1 л:

Модифицированный XLD-агар для чашек MP0311

Состав на 1 л. Формула скорректирована и стандартизирована для достижения заданных показателей эффективности. Цитрат аммонийного железа эквивалентен цитрату аммонийного железа(III).

Принцип действия и интерпретация

XLD-агар разработан для выделения и дифференциации кишечных патогенов, включая Salmonella Typhi, и других видов Salmonella. Модифицированный XLD-агар рекомендован для селективного выделения и количественного учёта видов Salmonella в соответствии с рекомендациями ISO и APHA. Условия инкубации пересмотрены согласно поправке 1:2020. Состав среды препятствует чрезмерному росту других микроорганизмов поверх колоний Salmonella и Shigella.

Дрожжевой экстракт служит источником азота и витаминов, необходимых для роста. Ксилоза, лактоза и сахароза являются сбраживаемыми углеводами. Ксилоза включена в состав для дифференциации Shigella: в отличие от практически всех представителей кишечной группы, Shigella не сбраживает ксилозу.

Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Лизин используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов. Salmonella быстро сбраживает ксилозу и исчерпывает её запас; после этого фермент лизиндекарбоксилаза декарбоксилирует лизин с образованием аминов. Это приводит к восстановлению щелочного pH, имитирующему реакцию Shigella. Чтобы предотвратить такую реакцию у лизин-положительных колиформных бактерий, в среду добавлены лактоза и сахароза, избыток которых приводит к образованию кислоты.

При расщеплении ксилозы, лактозы и сахарозы образуется кислота, из-за которой индикатор феноловый красный окрашивается в жёлтый цвет. Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, распознаются по красной окраске вокруг колоний, возникающей при повышении pH. Эти реакции могут протекать одновременно или последовательно; поэтому индикатор pH может приобретать различные оттенки, а при длительной инкубации цвет может меняться с жёлтого на красный.

Для дополнительной дифференциации в среду включена система индикации H₂S на основе тиосульфата натрия и цитрата аммонийного железа. Она выявляет образующийся сероводород: колонии приобретают чёрный центр. Непатогенные бактерии, продуцирующие H₂S, не декарбоксилируют лизин, поэтому возникающая кислая реакция препятствует почернению колоний.

XLD-агар является селективной и дифференциальной средой. Селективный компонент — дезоксихолат натрия; среда подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Методика проведения анализа

Нанесение посевного материала

Асептически нанесите на поверхность чашки исследуемый посевной материал в количестве 50–100 КОЕ: штриховым посевом, инокуляцией или распределением по поверхности.

Обогащение и выделение из образца

1. Предварительное обогащение. Образец массой 25 г внесите в 225 мл буферной пептонной воды (M1494I/GM14941) и инкубируйте при 34–38 °C в течение 18 ч ± 2 ч.
2. Селективное обогащение. Внесите 0,1 мл предварительно обогащённого образца в 10 мл бульона RVS (M14481) или на агар MSRV (M1428). Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч. Одновременно внесите 1 мл культуры в бульон MKTTn (M14961) и инкубируйте при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Выделение. Полученную культуру высейте на модифицированный XLD-агар (M0311/MP0311) и инкубируйте при 36 ± 2 °C в течение 24 ± 3 ч. Одновременно выполните посев на вторую селективную изолирующую среду.
4. Подтверждение. Для подтверждения выполните биохимические и серологические тесты.

Типы образцов

• Пищевые продукты и молочные продукты
• Вода

Контроль качества

Показатели готовой среды

• Внешний вид: стерильная чашка с модифицированным XLD-агаром в одноразовой чашке диаметром 90 мм
• Цвет среды: красный
• Объём среды: 25 мл в чашке диаметром 90 мм
• pH: 7,20–7,60
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики